Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

D ASAR T EORI Protein (asal kata protos dari bahasa Yunani yang berarti "yang paling utama").bahasa Yunani Protein ialah senyawa organikProtein ialah.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "D ASAR T EORI Protein (asal kata protos dari bahasa Yunani yang berarti "yang paling utama").bahasa Yunani Protein ialah senyawa organikProtein ialah."— Transcript presentasi:

1

2 D ASAR T EORI Protein (asal kata protos dari bahasa Yunani yang berarti "yang paling utama").bahasa Yunani Protein ialah senyawa organikProtein ialah senyawa organik kompleks berbobot molekul tinggi (polimer) dari monomer-monomer asam amino yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan peptidapolimer monomer asam aminoikatan peptida

3 Titik Isoelektrik adalah derajat keasaman atau pH ketika suatu makromolekul bermuatan nol akibat bertambahnya proton atau kehilangan muatan oleh reaksi asam-basa.pHproton reaksi asam-basa

4 Amino acid R groups

5 ANALISIS KUALITATIF PROTEIN 1. Pengendapan oleh garam, logam dan asam organik  Denaturasi adalah perubahan atau modifikasi terhadap struktur sekunder, tersier, dan kuartener pada molekul protein, tanpa terjadinya pemecahan ikatan-ikatan kovalen  Protein dengan penambahan asam atau pemanasan akan terjadi koagulasi.  Koagulasi adalah salah satu kerusakan protein yang terjadi akibat pemanasan dan terjadi penggumpalan dan pengerasan pada protein karena menyerap air pada proses tersebut Sampel : sesuai uji kuantitatif

6 Reaksi Umum dengan Logam

7 BahanTabung lTabung 2Tabung 3Tabung 4Tabung 5 Albumin telur1 ml NaCI 5%berlebih---- BaCl 2 5%-berlebih--- CaCl 2 5%--berlebih-- MgSO4 5%---berlebih- (NH 4 ) 2 SO4 jenuh ----berlebih Kocoklah tabung. Hasil: Endapan banyak/sedikit Hasil : Albumin standard Hasil pecobaan

8 2. Uji Biuret Uji biuret : untuk membuktikan adanya molekul2 peptida protein. Ion Cu 2+ (pereaksi biuret) dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida pada protein membentuk senyawa kompleks berwarna ungu atau violet

9 No.Zat UjiHasil Uji BiuretPolipeptida (+/-) 1.Albumin telur 1 % 2Albumin standard 1 % 3.Kasein 0,5% Hasil pecobaan

10 3. Uji Ninhidrin Ninhidrin ( Triketohirinden hidrat ) : suatu senyawa oksidator kuat yang apabila bereaksi dengan asam α amino pada pH 4-8 akan menghasilkan warna ungu No.Zat Uji Hasil Uji Ninhidrin Asam Amino Bebas (+/-) 1.Albumin telur 2% 2.Albumin standard 1 % 3.Kasein 0,5% Hasil pecobaan

11 ANALISIS KUANTITATIF PROTEIN Metode 1. Metode Biuret Sampel : putih telur (Gol I & II) Sampel : albumin darah (Gol III & IV) 2. Metode Lowry Sampel : putih telur (Gol I & II) Sampel : albumin darah (Gol III & IV) 3. Titrasi Formol Sampel : gelatin

12 1.Metode Biuret dan Lowry Dasar Metode  Biuret Berdasarkan pengukuran serapan cahaya oleh ikatan kompleks Cu(II)-protein (ungu kebiruan). Ion Cu 2+ (dari pereaksi biuret) dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida membentuk senyawa kompleks berwama ungu kebiruan.  Lowry Pembentukan ikatan kompleks Cu(II)-protein (Spt Biuret) Ion Cu 2+ Cu + Ion Cu + mereduksi reagen Folin-Ciocalteu (phosphomolibdat -phosphotungstat) heteropolymolybdenum blue Kekuatan warna biru : residu tryptophan dan tyrosine

13  Analisis kuantitatif protein metode Biuret & Lowry Spektrofometri  Langkah2 analisis secara spektrofotometri : 1.Penentuan Operating time (OT) 2.Lambda Max 3.Penentuan serapan kurva baku (sampel : putih telur) Perbandingan (Sampel : albumin darah) 4. Menentukan Kadar

14 Sampel : albumin darah Preparasi sampel Diambil 1 mL darah diendapkan + 4 mL aseton 100% (yang telah didinginkan dalam es). Sentrifugasi pada kecepatan rpm selama 20 menit pada 4 o C. Buang supernatannya, endapan dilarutkan dalam buffer fosfat (PBS = Phosphate Buffer Saline ) ad 10,0 mL. Penentuan serapan sampel Larutan albumin darah dipipet 50 μL +1ml reagen biuret. Diamkan pada suhu kamar sesuai OT. Baca serapannya dengan spektrofotometer pada λ maks Hitung kadar protein (g/dL)

15 Perhitungan kadar protein

16 (Vt – Vo) NaOH x 2, 8 % Nitrogen AA = x 100% =.... mg/100 ml lar. gelatin ml gelatin Hitung % nitrogen asam amino dengan rumus : Kadar protein : konversi % nitrogen AA ke protein (x 6,25) Buat kurva hubungan lama waktu inkubasi vs % kadar protein 2. Metode Titrasi formol

17


Download ppt "D ASAR T EORI Protein (asal kata protos dari bahasa Yunani yang berarti "yang paling utama").bahasa Yunani Protein ialah senyawa organikProtein ialah."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google