Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028."— Transcript presentasi:

1 Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle Surya Gaby Almira

2 Enzim papain merupakan enzim proteolitik yang dihasilkan dari isolasi penyadapan getah buah pepaya (Carica papaya, L.) Enzim Papain Kegunaan dari papain: Dalam industri makanan dan minuman : -pelunak daging -stabilizer dalam pembuatan jelly -pengental dalam pembuatan sirup sari buah -penggumpal susu dalam pembuatan keju Dalam bidang farmasi: -pelancar pencernaan -luka infeksi -mengurangi penggumpalan darah sebelum operasi

3 Tujuan Menentukan nilai Vmaks dan Km dari enzim papain Menentukan aktivitas enzim papain

4 Pepaya Getah pepaya mengandung tiga jenis enzim, yaitu enzim papain, kimopapain dan lisozim. Keistimewaan enzim papain Mempunyai kestabilan yang baik pada larutan yang mempunyai pH 5.0 Memiliki keaktifan daya tahan panas yang lebih tinggi dari enzim lain Tidak bersifat toksik Tak ada reaksi samping Dapat bekerja dengan baik pada konsentrasi rendah

5 Alat dan Bahan Alat :Bahan : – Gelas kimia- Buah pepaya muda – Tabung reaksi- Akuades – Inkubator 50 0 C- Aseton – Batang pengaduk/vortex- Bufer fosfat 0,1pH 7,0 – Spektrofotometer- Kasein 2% – Stopwatch- L-sistein 0,1 M – Freezdryer- Asam trikloro asetat - Standar Tirosin 1 mg/mL

6 Pengujian aktivitas enzim papain (Metode Murachi) Kasein L-sistein bufer fosfat Inkubasi 5 menit (500C) + papain Inkubasi 20 menit (500C) + TCA 20% Inkubasi 20 menit (500C) Sentrifugasi 10 menit Fitrat Ukur absorbansi (280 nm) Inkubasi t = 20 menit

7 Metode murachi Inkubasi t = 0 menit L-sistein bufer fosfat papain + TCA 20 % Inkubasi 20 menit (500C) + kasein Inkubasi 20 menit (500C) Sentrifugasi 10 menit Fitrat Ukur absorbansi (280 nm)

8 Data Pengamatan [Tirosin] (µg/mL) Absorbansi 400, , , ,815 Absorbansi Larutan Standar Tirosin Tabung (t = 0) Absorba nsi Tabung (t = 20) Absorba si 1010, , , , ,669 Absorbansi Larutan Sampel

9 Pengolahan Data Kurva Standar tirosin dari persamaan garis y = 0,0046 x + 0,0755 substitusi absorbansi maka diperoleh Tabu ng (t = 0) [Tirosi n] kontrol (µg/m L) Tabun g (t = 20) [Tirosi n] sampel (µg/m L) , , , , ,413

10 Pengolahan Data ( Penentuan Aktivitas Papain) TabungA[ Tirosin] ppm I0,32353, II0,49390, III1,277261, IV1,861388, V1,672347,

11 Aktivitas papain Tabung [ Tirosin] ppm I53, , , II90, , , III261, , , IV388, , , V347, , ,

12 Penentuan Vmaks dan Km Tabu ng [Tirosin] kontr ol (µg/mL) [Tirosin] samp el (µg/mL) [Tirosin] V 0 (µg/mL/menit) , , , , , , , , ,413 17,32065

13 Penentuan Nilai K M dan V max Berdasarkan Kurva Lineweaver-Burk [Kasein] (µg/mL)V0V0 1/[kasein]1/V 0 570,62, , , ,64, , , ,059780, , ,353260, , ,320659,01E-050,057735

14 Nilai Vmaks dan Km

15 Kurva michaelis menten

16 Pembahasan Fungsi reagen Kasein : substrat L-sistein : aktivator Buffer posfat : menjaga pH optimal TCA : menghentikan aktivitas enzim Inkubasi T= 0 -> blanko T= 20 -> sampel

17 Reaksi Hidrolisis

18 Thanks... ^^


Download ppt "Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google