Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028."— Transcript presentasi:

1 Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028

2 Enzim papain merupakan enzim proteolitik yang dihasilkan dari isolasi penyadapan getah buah pepaya (Carica papaya, L.) Enzim Papain Kegunaan dari papain: Dalam industri makanan dan minuman : -pelunak daging -stabilizer dalam pembuatan jelly -pengental dalam pembuatan sirup sari buah -penggumpal susu dalam pembuatan keju Dalam bidang farmasi: -pelancar pencernaan -luka infeksi -mengurangi penggumpalan darah sebelum operasi

3 Tujuan Menentukan nilai Vmaks dan Km dari enzim papain Menentukan aktivitas enzim papain

4 Pepaya Getah pepaya mengandung tiga jenis enzim, yaitu enzim papain, kimopapain dan lisozim. Keistimewaan enzim papain Mempunyai kestabilan yang baik pada larutan yang mempunyai pH 5.0 Memiliki keaktifan daya tahan panas yang lebih tinggi dari enzim lain Tidak bersifat toksik Tak ada reaksi samping Dapat bekerja dengan baik pada konsentrasi rendah

5 Alat dan Bahan Alat :Bahan : – Gelas kimia- Buah pepaya muda – Tabung reaksi- Akuades – Inkubator 50 0 C- Aseton – Batang pengaduk/vortex- Bufer fosfat 0,1pH 7,0 – Spektrofotometer- Kasein 2% – Stopwatch- L-sistein 0,1 M – Freezdryer- Asam trikloro asetat - Standar Tirosin 1 mg/mL

6 Pengujian aktivitas enzim papain (Metode Murachi) Kasein L-sistein bufer fosfat Inkubasi 5 menit (500C) + papain Inkubasi 20 menit (500C) + TCA 20% Inkubasi 20 menit (500C) Sentrifugasi 10 menit Fitrat Ukur absorbansi (280 nm) Inkubasi t = 20 menit

7 Metode murachi Inkubasi t = 0 menit L-sistein bufer fosfat papain + TCA 20 % Inkubasi 20 menit (500C) + kasein Inkubasi 20 menit (500C) Sentrifugasi 10 menit Fitrat Ukur absorbansi (280 nm)

8 Data Pengamatan [Tirosin] (µg/mL) Absorbansi 400,235 800,496 1200,609 1600,815 Absorbansi Larutan Standar Tirosin Tabung (t = 0) Absorba nsi Tabung (t = 20) Absorba si 1010,323 2020,493 3031,277 4041,672 5051,669 Absorbansi Larutan Sampel

9 Pengolahan Data Kurva Standar tirosin dari persamaan garis y = 0,0046 x + 0,0755 substitusi absorbansi maka diperoleh Tabu ng (t = 0) [Tirosi n] kontrol (µg/m L) Tabun g (t = 20) [Tirosi n] sampel (µg/m L) 101 53,80435 202 90,76087 303 261,1957 404 347,0652 505 346,413

10 Pengolahan Data ( Penentuan Aktivitas Papain) TabungA[ Tirosin] ppm I0,32353,80434783 II0,49390,76086957 III1,277261,1956522 IV1,861388,1521739 V1,672347,0652174

11 Aktivitas papain Tabung [ Tirosin] ppm I53,80434783161,413043516,14130435 II90,76086957272,282608727,22826087 III261,1956522783,586956678,35869566 IV388,15217391164,456522116,4456522 V347,06521741041,195652104,1195652

12 Penentuan Vmaks dan Km Tabu ng [Tirosin] kontr ol (µg/mL) [Tirosin] samp el (µg/mL) [Tirosin] V 0 (µg/mL/menit) 1 0 53,80435 2,690217 2 0 90,76087 4,538043 3 0 261,1957 13,05978 4 0 347,0652 17,35326 5 0 346,413 17,32065

13 Penentuan Nilai K M dan V max Berdasarkan Kurva Lineweaver-Burk [Kasein] (µg/mL)V0V0 1/[kasein]1/V 0 570,62,6902170,0017530,371717 1139,64,5380430,0008780,220359 284113,059780,0003520,076571 563817,353260,0001770,057626 1110017,320659,01E-050,057735

14 Nilai Vmaks dan Km

15 Kurva michaelis menten

16 Pembahasan Fungsi reagen Kasein : substrat L-sistein : aktivator Buffer posfat : menjaga pH optimal TCA : menghentikan aktivitas enzim Inkubasi T= 0 -> blanko T= 20 -> sampel

17 Reaksi Hidrolisis

18 Thanks... ^^


Download ppt "Isolasi Papain dan Karakterisasi Biokimia Michelle 10509016 Surya 10509002 Gaby Almira 10509028."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google