Petunjuk Materi Isolasi DNA Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung 2014.

Presentasi berjudul: "Petunjuk Materi Isolasi DNA Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung 2014."— Transcript presentasi:

1 Petunjuk Materi Isolasi DNA Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung 2014

2 CARA KERJA ISOLASI DNA Bahan baku pisang
Potong pisang 1-2 buah menjadi kecil-kecil Taruh pada blender serta campur dengan air sekitar 100 ml Tambahkan NaCl 1 ml dan Blender sampai halus Taruh hasil tersebut pada tabung conicel sampai 5 cc

3 5. Beri Larutan Lisis Buffer sekitar 750 mikro liter 6
5. Beri Larutan Lisis Buffer sekitar 750 mikro liter 6. Kocok dengan perlahan sekitar 1-3 menit 7. Diamkan sekitar 5-10 menit 8. Tambahkan 1 ml Proteinase K 9. Gojok perlahan-lahan sekitar 1-3 menit 10. Tambahkan etanol dingin 1/3 11. Amati hasil 12. Lakukan pembacaan pada spektofotometri

4 CARA KERJA ISOLASI DNA Bahan Baku buccal
Lakukan seperti Massage pada buccal Kumurr dengan menggunakan air selama minimal 3 menit Lalu tampung hasil air kumuran pada tabung conicel besar Tambah NaCl 1 mL. Tambah Buffer lisis (3cc) Perbandingan 20 :3 5. Kocok secara perlahan selama 1-3 menit

5 6. Tunggu selama 5-10 menit 7. Tambah Proteinase 1 ml 8
6. Tunggu selama 5-10 menit 7. Tambah Proteinase 1 ml 8. Kocok secara perlahan selama 1-3 menit 9. Tambahkan etanol dingin 1/3 nya 10. Amati hasil 11. Lakukan pembacaan pada spektofotometri

6 Panjang gelombang untuk membaca DNA adalah 260 nanometer Panjang gelombang untuk membaca protein adalah 280 nanometer 260/280 rasio ketentuan 1,8 (N) >1,8 kontaminan RNA < 1,8 kontaminan protein

7 Bahan untuk isolasi DNA berasal dari :
Tumbuhan Hewan contoh pada buccal Bakteri Pada tumbuhan yang banyak mengandung DNA: Bayam Kacang polong Pisang Brokoli Strawberry

8 Dinding sel (di pecah) membran (lisis)  inti sel  DNA dan protein histon  protein histon akan di pecah oleh enzim proteinase K DNA akan di presipitasi oleh etanol dingin agar presible seperti benang Untuk memecah dinding sel bisa di lakukan Di blender Di tumbuk Di simpan dengan suhu minus 70

9 Perbedaan isolasi DNA pada hewan dan tumbuhan adalah
Pada tumbuhan terdapat dinding sel jadi hari di pecah terlebih dahulu Sedangkan pada hewan tidak ada dinding sel maka langsung di beri buffer lisis