Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

DEWI SUSAN B (20509040) ISTHY EKA R (20509044) Cellobiose dehydrogenase.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "DEWI SUSAN B (20509040) ISTHY EKA R (20509044) Cellobiose dehydrogenase."— Transcript presentasi:

1 DEWI SUSAN B ( ) ISTHY EKA R ( ) Cellobiose dehydrogenase

2 AGENDA PENDAHULUAN ISOLASI, PEMURNIAN, DAN KARAKTERISASI APLIKASI KESIMPULAN 13/11/20092Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

3 Cellobiose dehydrogenase merupakan enzim yang mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi Pada umumnya terdapat pada white-rot,soft-rot,brown-rot fungi (Co: Termitomyces clypeatus, Sclerotium rolfsii, Ceriporiopsis subvermispora) Berperan dalam transfer elektron dari cellobiose dan cello-oligomers ke berbagai akseptor (co : ion logam & senyawa organik) yang dimediasi oleh gugus heme dan flavin pada enzim CELLOBIOSE DEHYDROGENASE... ??? 13/11/20093Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

4 TATANAMA Kelas 1: Oxidoreductases Enzim yang mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi Sub-kelas 1.1 Acting on the CH-OH group of donors EC With other acceptors Contoh : 2,6 dichloroindophenol ;phenol blue; cytochrome c EC cellobiose dehydrogenase /11/20094Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

5  Nama lain cellobiose dehydrogenase; cellobiose oxidoreductase; Phanerochaete chrysosporium cellobiose oxidoreductase; CBOR; cellobiose oxidase; cellobiose:oxygen 1-oxidoreductase; CDH; cellobiose:(acceptor) 1-oxidoreductase  Nama Sistematis cellobiose:acceptor 1-oxidoreductase NAMA ENZIM 13/11/20095Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

6 FUNGSI ENZIM  Mengoksidasi cellobiose menjadi cellobionic acid dan lactobionic acid  Berperan dalam hidrolisis selulosa, hemiselulosa atau lignin biosensor, bioremediation,biocatalysis 13/11/20096Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

7 STRUKTUR ENZIM Cellobiose dehydrogenase flavoprotein fragment in complex with cellobionolactam Ligand Interaction fo the CDH active site 13/11/20097Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

8 STRUKTUR ENZIM Ligand Interaction fo the CDH active site 13/11/20098Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

9 STRUKTUR ENZIM Hasil X-Ray CDH 13/11/20099Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

10 SUBSTRAT ENZIM  Karbohidrat Co: Selobiosa,laktosa,maltosa dll.  Akseptor elektron Co: 2,6 dichloroindophenol; phenol blue; cytochrome c 13/11/200910Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

11 CELLOBIOSA Disakarida dengan ikatan β(1→4) glikosidik Rumus Molekul : [HOCH 2 CHO(CHOH) 3 ] 2 O Dihasilkan secara enzimatis dari hidrolisis selulosa 13/11/200911Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

12 KOFAKTOR ENZIM FADHeme 13/11/200912Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

13 MEKANISME REAKSI 13/11/200913Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

14 MEKANISME 13/11/200914Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

15 PRODUK  cellobiono-1,5-lactone  reduced acceptor 13/11/200915Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

16 METODOLOGI Cultivation Pemurnian Karakterisasi Deglikosilasi SDS-Page & Isoelectric focusing Uji Aktivitas Parameter Kinetik Protein determination 13/11/200916Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

17 CULTIVATION Standard cultivationBioreactor cultivation Medium ( 30 g /L yeast extract, 30 g/L cellulose, 1 g/L MgSO4.7H2O, 0,3 ml/L trace element solution) Shaking flask cultures ( 300 ml medium, 30°C, 110 rpm, 30 days) Inokulasi pH 5,4; Autoclaves Medium ( 30 g /L yeast extract, 30 g/L cellulose, 1 g/L MgSO4.7H2O, 0,3 ml/L trace element solution) Shaking flask cultures ( 30°C, 150 rpm, 30 days) Inokulasi pH 5,4; Autoclave 13/11/200917Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

18 13/11/200918Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

19 Pemurnian Enzim Supernatan Sentrifuga (6000 g/ 15 menit) Filtrasi (Polyethersulfone hollow fiber cross-flow module) DEAE-Sepharose PHE Sepharose Mono Q column Supernatan enzim Filtrasi (Polyethersulfone hollow fiber cross-flow module) 13/11/200919Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

20 13/11/200920Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

21 SDS PAGE & ISOELECTRIC FOCUSING 13/11/200921Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

22 SPEKTRUM 13/11/200922Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

23 PARAMETER KINETIK 13/11/200923Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

24 PARAMETER KINETIK 13/11/200924Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

25 AKTIVITAS VS SUHU 13/11/200925Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

26 APLIKASI Sebagai elektroda pada amperometri biosensor untuk mengukur selobiosa dan laktosa Pengukuran selobiosa secara kolorimetri Biosensor untuk mendeteksi laktosa pada makanan (penderita laktosa intoleran) Mengukur aktivitas selulosa dan mengontrol kadar laktosa pada pembuatan keju Bleaching pulp Degrading and modifying poisonous aromatic waste products 13/11/200926Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

27 KESIMPULAN Cellobiose dehydrogenase (CDH) merupakan enzim ekstraseuler yang dihasilkan oleh wood- degrading fungi Cellobiose dehydrogenase berperan dalam mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi pada karbohidrat seperti selobiosa CDH banyak digunakan sebagai biosensor 13/11/2009Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase" 27 13/11/200927Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

28 DAFTAR PUSTAKA Harreither W., Sygmund C., Dünhofen E., Vicuna R., Haltrich D., Ludwig R., Cellobiose Dehydrogenase from the Ligninolytic Basidiomycete Ceriporiopsis subvermispora. Appl. Environ. Microbiol. 75:9, 2750–2757 Hallberg B., Henriksson G., Pettersson G., Vasella., Divne C., Mechanism of the Reductive Half-reaction in Cellobiose Dehydrogenase. The journal of biological chemistry. 278:9, Henriksson G., Pettersson G., Johansson G., A critical review of cellobiose dehydrogenases. Journal of Biotechnology.78, 93–113 13/11/200928Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"

29 13/11/200929Presentasi Enzimologi " Cellobiose Dehydrogenase"


Download ppt "DEWI SUSAN B (20509040) ISTHY EKA R (20509044) Cellobiose dehydrogenase."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google