ASPEK LABORATORIUM DEMAM BERDARAH DENGUE

Presentasi berjudul: "ASPEK LABORATORIUM DEMAM BERDARAH DENGUE"— Transcript presentasi:

1 ASPEK LABORATORIUM DEMAM BERDARAH DENGUE
ANDRI

2 Taksonomi Dengue Family : Flaviviridae Genus : Flavivirus
Spesies : Dengue virus

3 Infeksi Virus Dengue Disebabkan oleh virus Dengue RNA virus
Disebarkan oleh Aedes aegypti Terdapat 4 serotype ; Den-1, Den-2, Den-3, Den-4 Kasus I dilaporkan di Asia tahun 1780 Di Indonesia 1968 di Surabaya, konfirmasi virologi tahun 1970

4

5 Nyamuk Betina Ae.aegypti
Virus Dengue ditransmisikan oleh nyamuk betina Ae.aegypti Terutama di siang hari Telur dan larva diletakkan pada wadah buatan

6 Patofisologi Infeksi Virus Dengue
Teori Enhancing antibody oleh Halstead Teori virulensi oleh Rosen

7 TEORI ENHANCING ANTIBODY
SECONDARY HETEROLOGOUS DENGUE INFECTION REPLIKASI VIRUS ANAMNESTIC ANTIBODY RESPONE KOMPLEKS VIRUS ANTIBODY AGREGASI TROMBOSIT AGREGASI TROMBOSIT AKTIVASI KOAGULASI AKTIVASI KOAGULASI AKTIVASI KOMPLEMEN AKTIVASI KOMPLEMEN PENGHANCURAN TROMBOSIT OLEH RES PENGHANCURAN TROMBOSIT OLEH RES PENGELUARAN PLATELET FAKTOR III PLASMA AKTIVASI FAKTOR HAGEMAN TROMBOSITOPENIA KOAGULOPATI KONSUMTIF ANAFILATOKSIN SISTEM KININ PENINGKATAN PERMEABILITAS KAPILER KININ GANGGUAN FUNGSI TROMBOSIT GANGGUAN FUNGSI TROMBOSIT PENURUNAN FAKTOR PEMBEKUAN PENURUNAN FAKTOR PEMBEKUAN FDP MENINGKAT PERDARAHAN MASIF PERDARAHAN MASIF SYOK

8 Manifestasi Klinis Demam Sakit kepala Mual Sakit di belakang mata
Dehidrasi Epistaksis Kebocoran plasma Ptechie/purpura Respiratory distress

9 Klinis dan Laboratorium Infeksi Virus Dengue

10

11 Terapi Tidak terdapat terapi spesifik
Hanya terdapat terapi untuk memperbaiki manifestasi klinis yg ada Cairan pengganti, anti piretik, transfusi trombosit jika perlu Hindari pemberian aspirin

12 Preventif Eliminasi tempat berkembang nyamuk Hindari gigitan nyamuk
Tidak diperlukan imunisasi

13 Pemeriksaan Laboratorium
Pem Leukosit TEST TOURNIQUET TROMBOSIT PEMERIKSAAN HEMATOLOGI Hematokrit SEDIAAN HAPUS DARAH TEPI

14 Hemagglutination inhibition test Rapid Immunochromatographic Test
ELISA Rapid Immunochromatographic Test PEMERIKSAAN SEROLOGI

15 Kultur Virus RT-PCR DIAGNOSIS PASTI

16 Tes Tourniquet : Menilai gangguan vaskuler Hasil normal jika ptekie yg timbul dalam lingkaran diameter 5 cm posisi 4 cm bawah lipatan siku < 5 Hasil positif terdapat pada pula pada infeksi virus lainnya dan defisiensi vitamin C

17 Tes Tourniquet

18 Pemeriksaan Jumlah Leukosit :
Leukopeni Shift to the left Limfositosis Atau limfofeni Tidak Spesifik

19 Kadar Hematokrit : Hemokonsentrasi Indikator perembesan plasma Terjadi peninkatan > 20% Normal : ♀ : 35%-45% ♂ : 40%-50%

20 Jumlah Trombosit : Terjadi trombositopenia Muncul antara hari ke-3 sampai hari-7 demam Penyebab : virus Dengue & antibodi anti trombosit

21 Gambaran Darah Tepi Limfosit Plasma Biru
Respons imun spesifik virus dengue terhadap limfosit Proliferasi & transformasi sel menjadi besar RNA >>> Pewarnaan Romanowsky, sitoplasma biru Mulai timbul hari 3-6 LPB > 15% limfosit, atau > 4% leukosit

22 Limfosit Plasma Biru

23 LPB pewarnaan Wright Giemsa
LPB pewarnaan May Grunwald

24 Variasi Bentuk LPB Limfosit & LPB

25 Hemagglutination test
Baku emas WHO Metode Clark & Cassal Menetapkan titer antibodi-anti Dengue yg dapat menghambat kemampuan virus Dengue menaglutinasi eritrosit angsa Serum diambil sepasang Serum I saat akut (pasien datang) Serum II konvalesen (2-3 minggu dr saat sakit) Interval minimal 7 hari, optimal 10 hari

26 Interpretasi Hasil

27 Antigen-Antibodi Dengue

28 ELISA Deteksi antibodi : Indirect ELISA untuk IgG anti Dengue
IgM anti Captured (MAC ELISA) dan IgG anti Captured ELISA

29 Indirect IgG : Deteksi 100% setelah hari ke 7 demam Direkomendasikan jika IgM Dengue masih negatif setelah 7 hari Spesifitas kurang, reaksi silang dg flavivirus IgG antibodi capture ELISA merupakan pengembangan dari indirect IgG untuk kasus infeksi sekunder

30

31

32 MAC- ELISA : Digunakan untuk kasus infeksi primer 55% terdeteksi hari 4-7 demam 100% terdeteksi hari 7 demam Untuk kasus infeksi sekunder, 78% terdeteksi hari 7 demam 28% kasus infeksi sekunder tidak terdeteksi jika menggunakan IgM saja Positif palsu penyakit otoimun

33 Rekomendasi Pemeriksaan IgM & IgG
Lakukan pemeriksaan IgM Dengue segera pada pasien tersangka IgM dengue biasanya positif hari 5-7 demam Hasil IgM negatif pada pasien dg demam < 5 hari tidak mengekslusi infeksi Dengue Jika IgM Dengue negatif sebelum 7 hari demam, sampel diulang pada fase pemulihan untuk konfirmasi

34 Deteksi antigen : Deteksi antigen menggunakan mAb spesifik Paling sering dipakai adalah NS1 antigen untuk diagnosis awal infeksi Dengue Tidak dapat mengidentifikasi serotipe

35 NS1 merupakan glikoprotein yg penting bagi viabilitas virus
Sekresi protein NS1 merupakan penanda khusus infeksi flavivirus Deteksi infeksi primer 75%-97,3% lebih baik dari deteksi infeksi sekunder (60%- 70%) Sensitivitas berkurang pada hari 4-6 demam Tidak terdeteksi pada fase konvalesen

36 Rapid Immunochromatographic Test (ICT)
Mudah dikerjakan Mahal NS1 antigen IgM & IgG Dengue Prinsip pemeriksaan sama dg Capture ELISA

37

38 Positif Palsu ICT : Reaksi silang dg Flavivirus Non-Flavivirus : malaria, leptospirosis, toxoplasmosis, sifilis Connective tissue disorder : RA

39

40 Isolasi Virus : Diagnosis pasti Pengambilan sampel dalam 5 hari demam Bahan isolasi virus : serum, plasma, atau lapisan buffy-coat darah heparin Kultur sel yg paling banyak digunakan dari sel AP/61, C6/36, TRA-284-SF Hasil kultur diidentifikasi menggunakan immunoflouresens DFA atau IFA Keterbatasan : peralatan sulit, waktu 2-3 minggu

41 RT-PCR : Virus RNA, menggunakan reverse transcription polymerase chain reaction agar terbentuk cDNA & amplifikasi dg DNA thermal cycler Mengidentifikasi serotipe virus Dengue : Den1, Den2, Den3, dan Den4 Diagnosis awal (< 5 hari demam) Sensitivitas 100% pada demam < 5 hari, berkurang menjadi 70% hari 6

42 Keterbatasan RT-PCR : Hanya tersedia di tempat tertentu dg personel terlatih Mahal Spesimen harus punya penyimpanan khusus, waktu transportasi pendek Tidak direkomendasikan sebagai pemeriksaan rutin

43 TERIMA KASIH