PENGARUH AKTIVATOR, INHIBITOR DAN KADAR ENZIM PADA REAKSI ENZIMATIK Tujuan : Mengetahui pengaruh aktivator, inhibitor dan kadar enzim terhadap reaksi enzimatik

I. A B C D III. IV. V. 0 I 5 I 10 I 15 I 20 I II. KOCOK 15 ml lar.buffer Ph 6,5 3 ml lar substrat 6 ml lar. aquadest 15 ml lar.buffer Ph 6,5 3 ml lar substrat 6 ml lar. NaCL 0,9% 15 ml lar.buffer Ph 6,5 3 ml lar substrat 5 ml lar. aquadest 15 ml lar.buffer Ph 6,5 3 ml lar substrat 5 ml lar. Aquadest 5 tetes lar HgCl2 Pipet 1 ml lar. dr erlenmeyer STOP WATCH III. IV. 1 ml Enzim ke erlenmeyer A,B & D, erlenmeyer C + 2 ml Enzim V. PIPET 1 ML 1 ML 1 ML 1 ML 1 ML 0 I MASING- MASING DIISI 10 ML HCL 0,05 N 5 I 10 I 15 I 20 I II. KOCOK

BACA DENGAN SPEKTROFOTOMETER B & L + 1 ML LARUTAN KI – KIO3 KOCOK  TUNGGU 5 I - 10 I BACA DENGAN SPEKTROFOTOMETER B & L ( ג = 620 nm ) % SUBSTRAT YANG DICERNA : ( ABSORBANCE ) t ( ABSORBANCE ) to 100 % - x 100 %

Hasil percobaan A lebih baik dari pada percobaan C HASIL PRAKTIKUM : Δ S A C B D t ( waktu ) Hasil percobaan A lebih baik dari pada percobaan C

1. Fungsi HgCl2 : inhibitor non kompetitif irreversible 2. Perbedaan percobaan : A. Melihat pengaruh aktivator pd reaksi enzi- matik NaCl B. Sebagai pembanding tanpa modifier C. Melihat pengaruh kadar enzim yang lebih besar pd reaksi enzimatik D. Melihat pengaruh inhibitor nonkompetitif pada reaksi enzimatik HgCl2

3. INHIBITOR KOMPETITIF - Efek inhibitor dapat ditiadakan dengan pening- katan kadar substrat - Selalu bersifat reversible - Enzim hanya dapat mengikat salah satu substrat atau inhibitor - Dapat mengikat enzim bebas - Tidak dapat membentuk ikatan dengan kompleks enzim-substrat

Menaikkan harga Km Tidak mengubah harga Vmax

4. GRAFIK LINE WEAVER – BURK DARI REAKSI ENZIMATIK

LINE-WEAVER BURK : 1/Vo = Km + [S] Vmax [S] = Km + [S] Vmax [S] Vmax [S] = Km . 1 + 1 Vm [S] Vmax Grafik Line-Weaver Burk merupakan transforma si dari Kurve Michaelis-Menten

5. Pengaruh kadar enzim terhadap reaksi enzima tik adalah : - kadar enzim berbanding lurus dengan kecepa- tan awal reaksi - kadar enzim sebanding dengan kenaikan kece patan awal reaksi ( t=o) - bila reaksi sudah berjalan, maka kecepatan tidak sesuai dengan kadar enzim

V t=0 [S]