Penyiapan Sampel.

Presentasi berjudul: "Penyiapan Sampel."— Transcript presentasi:

1 Penyiapan Sampel

2 PS 2010

3 PS 2010

4 PS 2010

5 PS 2010

6 PS 2010

7 PS 2010

8 Supercritical fluid extraction
elekroforesis Supercritical fluid extraction PS 2010

9 Bagaimana seharusnya sampel disiapkan ? ? ? PS 2010

10 Rumus [ molekul, bangun ]
C7H6O3 C7H6O3 C7H6O3 Apakah Informasi Yang Diperoleh ??? VMA 2010 PDHLN

11 Asam Salisilat

12 As. Salisilat - Fluorescensi

13 Pustaka Moffat, A.C., 1986, Clarke’s Isolation and iden tification of drugs in pharmaceuticals, body fluids, and post-mortem material, Second edition, Pharmaceutical Press, London. Informasi: - Kelarutan - Tes warna - pKa logP - Gas Chromatogr. - UV Spectr. - Infra Red Spectr. - TLC - HPLC PS 2010

14 Perhatikan bentuk sampel
Serbuk Tablet Sirop Cairan Lain … ? PS 2010

15 Pemisahan Pemisahan senyawa dari cupilkan/sampel: padat, cair, cairan biologis (urin, darah, faeces), jaringan tanaman, dll, dilakukan dengan: - distilasi, soxhletasi, - ekstraksi cair-cair - deproteinisasi sampel - ekstraksi dengan kolom PS 2010

16 Penimbangan

17 Cara Penimbangan Timbang lebih kurang Timbang saksama Prosedur :
- Timbang saksama lebih kurang 100 mg sampel yang telah dihomogenkan… PS 2010

18 Penimbangan Apa yg pertama harus dilakukan ?
Bagaimana memilih neraca yang tepat dan benar ? Wadah jenis apa yang digunakan ? PS 2010

19 TEKNIK MENIMBANG Weighing by difference: Wadah + zat = A g
Wadah + sisa = B g Berat zat = A - B g Weighing by addition: Wadah ditimbang = C g Wadah + zat = D g Berat zat = D - C g PS 2010

20 - Analytical 0,1 4 - Semimicro 0,01 5 - Micro 0,001 6
SR-03 : Persyaratan Tambahan Untuk Akreditasi Laboratorium Pengujian Kimia dan Biologi Balance Kepekaan (mg) Digit [dbk, g] - Analytical 0, - Semimicro , - Micro , - Ultramicro , Berapa mg terkecil bahan boleh ditimbang dengan neraca tersebut di atas ? PS 2010

21 SR-03 Neraca: Untuk semua tipe neraca tsb di atas pada saat digunakan, parameter yang harus dicek: level of balance zero point cleanliness Tiap bulan(an): cek akurasi, dengan standard reference weights one point check calibration procedure should be documented PS 2010

22 SR-03 Neraca: Tiap setengah tahunan: parameter diperiksa: menggunakan:
repeatability linearity Reference weights accuracy PS 2010

23 SR-03 Persyaratan/catatan: Calibration over full range
Repeatability of readings: 10 kali penimbangan dilakukan dengan anak timbangan mendekati berat maksimal kapasitas neraca. Reference weights to be calibrated every three years. PS 2010

24 Bagaimana dengan microbalance ?
Kalibrasi dilakukan tiap 4 bulanan menggunakan = reference weights Parameter yang dicek: Repeatability Linearity Accuracy PS 2010

25 Neraca Bagaiamana sebaiknya kalibrasi neraca tersebut dilakukan ?
Siapa yg harus mengkalibrasi ? PS 2010

26 Deproteinisasi PS 2010

27 Deproteinisasi Mengapa Sampel Perlu di deproteinisasi ? ? ? PS 2010

28 Metode yang paling umum digunakan : - Pengendapan protein
Deproteinisasi Metode yang paling umum digunakan : - Pengendapan protein sebagai garam yang tidak larut PS 2010

29 Pengaruh pH Protein muatan positif muatan negatif
pH rendah ( asam kuat ) pH tinggi ( basa kuat ) muatan positif muatan negatif PS 2010

30 bereaksi dng anion ttt. membentuk garam tak larut
Pengaturan pH Sampel (protein) pH larutan < pH larutan > titik isoelektrik protein sbg kation protein sbg anion bereaksi dng anion ttt. membentuk garam tak larut bereaksi dng kation ttt. membentuk garam tak larut PS 2010

31 Precipitating Agents Anionik Kationik pikrat
Ion-ion logam berat spt. : molibdat tungstat sulfosalisilat metafosfat perklorat trikloroasetat - seng merkuri Kadmium uranium besi tembaga timbal (Zn) (Hg) (Cd) (U) (Fe) (Cu) (Pb) ZnSO4 ZnSO4/Ba(OH)2 PS 2010

32 Protein Structure McMurry, J
Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition p Protein PS 2010

33 Protein Structure McMurry, J
Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition, p. 1011 Secondary Tertiary PS 2010

34 Protein Structure McMurry, J
Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition p. 1016 Protein denaturation heat PS 2010

35 Deproteinisasi dgn dehidrasi
Bila sejumlah tertentu air dihilangkan dari protein Protein akan mengendap SENTRIFUGASI PS 2010

36 Deproteinisasi dgn cara dehidrasi
“ Solvent “ ( suhu rendah ) Asetonitril Aseton Metanol Etanol “ Salting out ” ( protein pada titik isoelektrik ) + Garam ( Na sulfat, Na sulfit ) Protein mengendap PS 2010

37 PS 2010

38 PS 2010

39 Penyiapan Sampel mineral PS 2010

40 Penyiapan Sampel Mineral
( unsur logam ) analisis secara : Atomic Absorption Spectrophotometry Sampel harus diperlakukan khusus DIGESTI / DESTRUKSI PS 2010

41 Destruksi Bahan Organik
Wet digestion menggunakan : - Asam pengoksidasi - Campuran asam Sampel : - jaringan hewan / tanaman - bahan organik Misal : HNO3 + HClO4 + H2SO4 (3 : 1 : 1) HNO3 + H2SO4 (20 – 30 mL : 5 mL) HNO3 + HClO4 PS 2010

42 Destruksi Bahan Organik …
Waktu : 0,5 – 1 jam Lakukan : Dalam almari asam Hasil : Bahan organik teroksidasi  CO2 + H2O + bahan volatil meninggalkan : - sisa garam - asam anorganik PS 2010

43 Dry Ashing Wadah : Krus porselin Tempat : Tungku / Furnace
(suhu : 400 – 700 °C) Oksidan : O2 (udara) Hasil : - Bahan organik terbakar - Residu senyawa anorganik PS 2010

44 Dry ashing … Bahan pengoksidasi tambahan : Mg(NO3)2 Residu :
- Pindahkan dari krus dengan bantu- an HCl 6 M Waktu : 2 – 4 jam PS 2010

45 Sampel Sampel padat Sampel cair Sampel sediaan obat - tablet - sirop
- kapsul - cairan - kaplet - injeksi PS 2010

46 Sampel … Penyiapannya ikuti : Farmakope Indonesia atau Compendia Resmi
( USP, BP, Eur.P, Jpn.P ) PS 2010

47 PS 2010

48 Liquid-Liquid Extraction (LLE)
Sample Schematic of LLE process

49 PS 2010