Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor Desember 2010

Presentasi berjudul: "Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor Desember 2010"— Transcript presentasi:

1 Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor 13-14 Desember 2010
Kesimpulan: Transplantasi menggunakan ikan nila resipien triploid dengan sel donor dari ikan gurame muda menghasilkan kolonisasi lebih baik dibandingkan dengan menggunakan resipien ikan nila diploid. Keberhasilan kolonisasi sel donor ikan gurame strain bastar (80%) sedikit lebih tinggi dibandingkan dengan blue saphire (75%) Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor Desember 2010

2 Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor 13-14 Desember 2010
Rencana Selanjutnya: Ikan 2N jantan tanpa transplantasi : Matang (mature) vs. Gonad ikan 3N hasil transplantasi : Belum matang Analisis proliferasi dan diferensiasi sel donor dalam gonad ikan resipien Analisis kemampuan sel donor membuahi / dibuahi Seminar Hasil-hasil Penelitian LPPM IPB, ICC Bogor Desember 2010

3 TERIMA KASIH

4 Testes of vasa-GFP trout
精原幹細胞の移植方法です。 本実験では、緑色蛍光で標識された生殖細胞を持つvasa-GFP遺伝子導入ニジマスの ９～１０ヶ月齢、雄個体をドナーとしました。 ドナーより摘出した精巣をトリプシンで解離し、こちらのような精巣細胞懸濁液を得ました。 この懸濁液中には、大量の精原幹細胞が含まれていると考えられます。 これをガラスマイクロピペットに吸引します。 こちらは、およそ15,000細胞を含む懸濁液を吸引したピペットです。 懸濁液中の生殖細胞が緑色蛍光を発していることが確認できます。 続いて、ピペットに吸引した懸濁液を、宿主である野生型ニジマス孵化稚魚の腹腔内へ 顕微注入し、精原幹細胞の移植を行いました。 移植後、適時、宿主個体の解剖観察を行い、 宿主生殖腺内におけるドナー生殖細胞の追跡を行いました。 その結果、移植10日後までは、 宿主生殖腺内に取り込まれたドナー生殖細胞は確認されませんでした。 Testes of vasa-GFP trout Recipient (non-tg) Intraperitoneal transplantation Testicular cell suspension (Okutsu et al. 2006, PNAS) Yoshizaki, 2008: Simposium Bioteknol. Akuakul., ICC IPB-Bogor, 14 Agustus 2008.

5 Testis Testis dari ikan gurame ukuran 800 g
Vas deferens 20 µl spermatosit spermatogonia spermatid Spermatogonia-B Spermatogonia-A Spermatosit Spermatid Sel testikular hasil disosiasi Histologi testis, pewarna HE

6 Persentase kolonisasi sel donor ikan gurame dalam gonad ikan nila
Metode disosiasi Umur larva (hari) Jumlah ikan diperiksa (ekor) Persentase kolonisasi Estimasi jumlah sel terkolonisasi Tryp-PBS 2 4 25 38 3 NA 5 6 Tryp-PBS/ 1 FBS/DNase 50 28 ; 55 75 47; 50; 91 100 banyak NA: belum dianalisis Kesimpulan: Sel spermatogonial ikan gurame dapat terkolonisasi dalam gonad ikan nila Kedua larutan disosiasi dapat digunakan dalam disosiasi sel testikular untuk transplantasi