KINETIKA ENZIM Penting untuk : Memahami fungsi katalitik

Presentasi berjudul: "KINETIKA ENZIM Penting untuk : Memahami fungsi katalitik"— Transcript presentasi:

1 KINETIKA ENZIM Penting untuk : Memahami fungsi katalitik
Memahami fenomena biologik, pengaruh suhu, pH dll. Prosudur pemurnian enzim

2 Pengukuran aktivitas enzim:
Berdasar pada aktivitasnya. 1 IU, micromol P/menit Pada enzim tertentu : 1 IU, perobahan kepekatan pada 340nm sebesar 0,001 per menit Kecepatan reaksi : jumlah substrat yg diubah per satuan waktu jumlah produk yg terbentuk per satuan waktu

3

4

5 Kecepatan awal : Pada waktu kadar substrat, produk dan enzim, suhu, pH dapat diketahui dengan tepat. Pada awal reaksi. Pada waktu kurve perjalanan masih lurus. Biasanya berkurangnya substrat < 10%. Cara mengukur kecepatan awal Ambil bagian pada kurve perjalanan yang masih Berupa garis lurus (pada awal reaksi) Kecepatan awal berbanding lurus dengan kadar enzim

6 Pengaruh kadar substrat terhadap reaksi enzimatik
Melakukan beberapa kali percobaan kondisi sama kecuali kadar substrat Kadar substrat absis ( x ) Kecepatan awal Vo ordinat ( y ) Kurve berbentuk hiperbola

7 Persamaan Michaelis-Menten
Vomax [S] Vo= Km + [S] Apabila [S] <<< Km [S] >>> Km [S] = Km

8 [S] <<< Km

9

10 Double reciprocal atau Lineweaver-Burk plot

11 Pengaruh pH terhadap reaksi enzimatik
pH mempengaruhi muatan Muatan mempengaruhi struktur enzim Selanjutnya akan mempengaruhi reaksi E S Akibatnya kecepatan reaksi dipengaruhi

12

13 Pengaruh pH Pepsin pH optimum 1,6 2) Glukosa 6 fosfatase pH optimum 7,8

14 Pengaruh temperatur Makin tinggi temperatur Makin mudah rusak Enzim lebih stabil pada Temperatur yang rendah

15 INHIBITOR Berdasar ikatan enzim : -inhibitor reversibel
-inhibitor irreversibel Berdasar sifat kinetika : -inhibitor kompetitif -inhibitor nonkompetitif

16 INHIBITOR KOMPETITIF Selalu bersifat reversibel E + I  EI ES + I +

17 Inhibitor kompetitif reversibel
Efeknya dapat dihilangkan dengan menambah substrat Analog substrat : Strukturnya mirip substrat Terikat di aktif site

18

19

20

21 E + I  EI ES + I  ESI Inhibtor nonkompetitif :
a) Inhibitor nonkompetitif reversibel Dpt berikatan dgn E bebas juga dengan ES komplek E + I  EI ES + I  ESI Terikat tidak pada aktif site Strukturnya tidak mirip substrat

22

23

24 Inhibitor nonkompetitif irriversibel
Berikatan dgn enzim secara irriversibel Merobah seluruh konformasi enzim Enzim menjadi inaktif Secara kinetika mirip nonkompetitif reversibel Menurunkan Vmax Tidak menurunkan Km Contoh : Hg++, Ag++, Ba++