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实验一 果蝇（ Drosophila melanogaster ） 遗传学系列实验（一） ( 教材 p70-75) 果蝇的观察、性别鉴定、接种与培养
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主要实验内容： 1 培养瓶棉塞的制作、灭菌，培养基配制 2 观察辨认： 生活史的观察； 各类突变类型的观察； 雌雄性别的鉴别（ 熟练，准确 ） 3 总结： 果蝇遗传学理论和应用研究中的重要意义。 目的： 掌握遗传学模式物种（果蝇）的特征、培养方法
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下面先准备果蝇杂交用的试管及棉塞： 大试管 大试管 3 支 / 小组（亲本杂交用） 免疫小指管 20 只 / 小组（挑处女雌用） 小试管 6 个 / 组（收集亲本雄蝇） 滴管 1 支 / 小组 灭菌 （各小组可用报纸包在一起） 将棉花以纱布 包裹制做棉塞 滤纸条 （吸水） 灭完菌取出 （背景知识讲完、灭菌基本结束时，用这些物品制作培养管。）
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背景知识： 1. 果蝇（ Drosophila melanogaster ） : 昆虫纲 ， 双翅目，有翅亚目， 果蝇科 / 属 常用的黑腹果蝇在自然界广泛存在。 Drosophila :” 喜欢露水 ” ； melanogaster ： ” 黑色消化道 ” ——“ 黑肠喜露果蝇 ” （黑腹果蝇） 果蝇科有 60 多属，果蝇属最常见
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2. 果蝇作为遗传学研究材料的优点 体型小 繁殖力强 世代周期短 易饲养 突变体多，遗传背景清楚 染色体少，有巨大染色体
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3. 果蝇生活史 完全变态 最适温度： 20-25 ℃ 25 ℃ 十天左右一个周期 成虫寿命 ~4 周 羽化后 12h 可交配 →2d 后产卵
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5. 培养条件 4. 结构特征 分 头、胸、腹 雌雄区别明显： 个体大小 腹部形态 腹部背面条纹 腹部腹片 交配器官 性梳的有无 食性：酵母菌等 培养基：玉米酵母培养基
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白眼（ white ） w 1 复眼白色（野生型复眼呈红色） 黑檀体（ ebony ） e 3 身体呈乌木色，黑亮 黑体（ black ） b 2 体黑色，比黑檀体深 黄体（ yellow ） y 1 全身呈浅橙黄色 残翅（ vestigial ） vg 2 翅明显退化，只残留一部 分痕迹，不能飞 小翅（ miniature ） m 1 翅比野生型者短，与腹部 末端几乎等长 卷刚毛（ singed ） sn 3 1 刚毛呈卷曲状 棒眼（ Bar ） B 1 复眼呈狭窄垂直棒形，小 眼数少 褐眼（ brown ） bw 2 眼呈褐色 卷曲翅（ Curly ） Cy 2 翅膀向上卷曲，纯合致死 叉毛（ forked ） f 1 体毛和刚毛分叉且卷曲 猩红眼（ scarlet ） st 3 复眼呈明亮猩红色 突变性状 基因符号 染色体定位 性状特征
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残翅 棒眼 白眼 黑檀体 野生型 小翅
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直刚毛 卷刚毛
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方法步骤 1. 果蝇生活史的观察： p73-74 卵、幼虫、蛹、成虫 2. 果蝇成虫外形的观察和性别鉴定 : p71 取蝇：培养瓶 - 麻醉瓶口对口 麻醉： 2-3 滴乙醚， 2-3min （死亡标志？） 观察：塑料垫板，毛笔，放大镜 放回培养：平躺苏醒 → 扶正培养 * 列表：雌雄区别 3. 果蝇几种突变类型的观察 * 列表：下页
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类型 特征 野生型 （ + ） 黑檀体 （ e ） 残翅 (vg) 白眼 （ w ） 小翅 (m) 卷刚毛 （ sn³ ） 黄体 （ y ） 棒眼 （ B ） 体色 眼色 翅形 眼形 刚毛 形态 填表：
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本实验室的三隐性：白眼，小翅，卷刚毛 符号 X mwsn3
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果蝇培养基配方 玉米粉 80g 蔗糖 70g 加水至 1000ml 混匀、 加热 琼脂粉 7g 不断搅拌至煮沸 2-3 分钟 15% 苯甲酸 2ml 正丙酸 2ml 稍凉（ 50-60 ℃）后加干酵母粉 20g 每小组配置 200ml 防腐，配少量时可估计 混匀，倒进培养瓶 ( 管 ) ，冷凝（大试管摆放斜面）
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常见错误 / 问题 镊子 / 手取果蝇 白板、手掌大批倾倒 果蝇入瓶 条纹不清 过烫时加酸、酵母 导致死亡、污染 污染、黏着 难辨雌雄（因刚孵出。可 借助性梳） 酸挥发、酵母烫死（应在 50-60 ℃） 错误 / 问题 后果（说明）
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1. 通过本试验可达到哪些目的？ 2. 通过你对果蝇雌雄个体的鉴别，你认为哪几个特征 在鉴别中是主要的？ 思考题
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