BIOASSAY oleh Lilik Zakiyaturrodliyah. 120332400218 Mukhamad Syaifudin BIOASSAY oleh Lilik Zakiyaturrodliyah 120332400218 Mukhamad Syaifudin 120332400227 Nanda Ratih Nilamsari 120332421499

Sejarah bioassay Paul Ehrlich Bermula pada akhir abad ke-19 Paul Ehrlich meneliti standarisasai antitoksin difteria, sejak saat itu bioassay tidak hanya digunakan dalam farmapologi, namun juga digunakan pada cabang scince yang lain, seperti patologi tumbuhan.

Pengertian Bioassay Bioassay adalah sebuah metode yang dirancang untuk menganalisis suatu senyawa oleh dosis yang sesuai terhadap sistem biologi seperti binatang, jaringan, mikroba dll

Prinsip Bioassay Membandingkan sampel yang diuji dengan zat standar internasional dengan perlakuan yang sama.  Menentukan jumlah sampel uji yang diperlukan untuk mengukur respon biologis yang setara dengan substansi standar.

Struktur of a biological assay Bioassay secara khusus melibatkan stimulus/rangsangan (misalnya Vitamin B, obat-obatan, atau pestisida) yang di aplikasikan terhadap subjek/sampel (misalnya, hewan, tumbuhan, atau mikroba). Intensitas yang dipakai dalam mengetahui efektifitas rangsangan biasanya digunakan istilah “Dosis”

Sumber : Gutleb_et_al_2004_8th_OSG_Proc-1

Bioassay kontak langsung (residu) Macam-macam bioassay Bioassay kontak langsung (residu) Bioassay kontak tidak langsung (air bioassay) (residu) Bioassay untuk pengasapan (fogging/ULV)

Bioassay langsung Merupakan uji dosis standart dan uji preparasi untuk menghasilkan respon yang spesifik, dan dapat diukur secara langsung. Perbandingan antara dosis estimasi dari uji preparasi relatif standar Misalnya : Serangan jantung Digitalis yang diinduksi pada marmut , dosis diukur ketika senyawa diinjeksikan, menyebabkan jantung berhenti (menyebabkan kematian)

Bioassay tidak langsung Merupakan hubungan antara dosis dan respon pada persiapan yang dipastikan. Dosis yang diberikan disesuaikan terhadap respon yang dihasilkan dari hubungan terhadap masing-masing preparasi secara terpisah

Bioassay untuk pengasapan (fogging/ULV) Prinsipnya adalah pengukuran efektivitas dari pengasapan / fogging atau penyemprotan ULV. Misalnya : Nyamuk dalam kurungan dapat diletakkan dalam ruangan lalu disemprot, atau digantung pada jarak tertentu ( didalam atau diluar ruangan ) dari tempat penyemprotan lalu disemprot. Waktu pemaparan 1 jam, tiap 15 menit/selama pemaparan dihitung nyamuk yang pingsan.

2. End Point or Quantal Assay Metode bioassay 1. Graded Response Assay 2. End Point or Quantal Assay

Graded Response Assay Dalam metode ini, jika dosis ditingkatkan, maka Respon juga akan meningkat, dan akhirnya mencapai tingkat yang stabil yang disebut celling effect

Memunculkan respon 'Semua atau Tidak' pada hewan yang berbeda End Point or Quantal Assay Memunculkan respon 'Semua atau Tidak' pada hewan yang berbeda Misalnya. Serangan jantung Digitalis diinduksi pada marmut kejang hipoglikemik pada tikus. Digitalis diinduksi penurunan kepala pada kelinci Perhitungan LD50 pada tikus atau tikus

Teknik bioassay Teknik in vivo Teknik in vitro Teknik ex vivo

misalnya: Dengan menggunakan tikus, kelinci dll 1. Teknik in vivo Teknik ini menggunakan hewan hidup yang direkomendasikan untuk tujuan uji. Teknik ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh biologis atau respon dari senyawa di bawah pemeriksaan dalam sistem hidup secara langsung. misalnya: Dengan menggunakan tikus, kelinci dll

2. Teknik in vitro Teknik ini menggunakan kultur sel sistem biologi yang dianjurkan untuk mempelajari pengaruh senyawa pada kondisi standar  yang tidak mirip dengan lingkungan hidup. Di sini kultur sel bertahan dengan pemanfaatan nutrisi di media. misalnya: penggunaan sel induk, kultur sel, mikroba (bakteri) dll

3. Teknik ex vivo Teknik ini menggunakan jaringan atau sel-sel dari sistem kehidupan dianjurkan untuk mempelajari pengaruh senyawa yang diuji dalam kondisi yang sesuai dalam waktu yang ditentukan terhadap kelangsungan hidup organ luar tubuh 

Penggunaan Bioassay Penggambaran dari transkripsi gen dapat diukur oleh adanya kontaminasi yang menyertainya. Dalam hal ini aktivitas dari Ah-receptor tergantung pada aktivitas gen. Sehingga dapat dilakukan analisis dengan mengukur cahaya yang diberikan setelah penambahan luciferin. Biasanya untuk kebutuhan analisis digunakan Microplate Fluoroscein Reader

Aplikasi

Kelebihan 1. bioassay tidak hanya membantu untuk menentukan konsentrasi, tetapi juga dapat menentukan potensi sampel. (Potensi adalah istilah yang menunjukkan aktivitas senyawa per basis molekul. Yaitu jika senyawa menunjukkan aktivitas yang lebih baik pada konsentrasi menit, semakin besar potensi, dan jika aktivitasnya rendah pada konsentrasi yang lebih rendah, maka lebih rendah pula populasinya).

kelebihan 2. bioassay digunakan untuk standarisasi obat-obatan, vaksin, toksin atau racun, desinfektan, antiseptik dll. 

3. Membantu menentukan kekhususan suatu senyawa yang akan digunakan kelebihan 3. Membantu menentukan kekhususan suatu senyawa yang akan digunakan misalnya: Penisilin, Penisilin efektif terhadap Gram ve tapi tidak pada Gram-ve.Pengujian pasien yang terinfeksi sputum membantu menentukan anti-biotik yang diberikan untuk pemulihan cepat.

kelebihan 4. senyawa kompleks tertentu seperti vitamin B-12 yang tidak dapat dianalisis dengan teknik uji sederhana dapat efektif jika diperkirakan oleh Bioassays. 5. Kadang-kadang komposisi kimia sampel berbeda tetapi memiliki aktivitas biologis yang sama. Sumber : bioassay_2

Video 1 Video 2