DASAR-DASAR PENGKLONAN GEN Perbanyakan Suatu Bahan Hayati yang Menghasilkan Bahan Yang Identik Dengan Bahan Asalnya. KLON : Kumpulan Individu (Bahan) yang Identik yangDiperbanyak Dari Individu (Bahan) yang Sama
TUJUAN PERBANYAKAN GEN : Mendapatkan Gen Sebagai Penelusur Mendapatkan Gen Untuk Dianalisis Urutan Nukleotidanya Mendapatkan Untuk Diekspresikan di Sel Inang TAHAPAN KLON GEN : Isolasi DNA (gen) Penyisipan DNA ke Dalam Vektor Untuk Membentuk Rekombinan Pemasukan Vektor Rekombinan Yang Membawa Sisipan ke Dalam Sel Inang
KOMPONEN YANG DIPERLUKAN DALAM KLON GEN : DNA Asal Vektor Pembawa Molekul DNA (gen) Enzim Restriksi Enzim Ligase Sel Inang
1. DNA Asal : - Tumbuhan - Hewan - Bakteri 2. VEKTOR - Plasmid - Kosmid - Virus / Fage
VEKTOR : Wahana Untuk Membawa Fragmen DNA Asing ke dalam Sel Inang dan Bertanggung Jawab atas Replikasinya Sendiri PLASMID DNA Ekstrakromosom DNA Utas Ganda Sirkuler Berukuran Kecil Dapat Melakukan Replikasi Secara Genetik Dapat Ditransfer Secara Stabil
MACAM PLASMID : Plasmid F (Fertilitas) membawa gen tra Plasmid R (resistensi) Plasmid Col (toksin ) Plasmid Tol (degradatif) Plamid Virulensi (pTi)
PLASMID F
REPLIKASI PLASMID
FAGE / BAKTERIOFAGE Virus Yang Menginfeksi Bakteri FAGE MEMPUNYAI 2 SIKLUS HIDUP : - Siklus Litik - Siklus Lisogenik FAGE YANG DIGUNAKAN DALAM KLON GEN - Fage - M13
STRUKTUR FAGE
PERBANYAKAN FAGE
MOLEKUL DNA
PEMAKETAN DNA
KOSMID Gabungan Antara Bagian Plasmid dan Bagian Sisi Cos dari Bakteriofage BAGIAN PLASMID Titik Replikasi (ORI) Penanda Ketahanan Genetik Tempat-tempat Restriksi Untuk Penyisipan Gen
KLONING MENGGUNAKAN KOSMID