MASTURA NIM : Seminar Penelitian (KI-70Z2), 29 Agustus 2007
Latar Belakang Tujuan Tinjauan Pustaka Metodologi Hasil dan Pembahasan Kesimpulan
Peneliti terdahulu telah menggunakan metode RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism ) untuk menentukan haplogroup mtDNA manusia Penelitian mengenai polimorfisme mtDNA manusia berdasarkan enzim restriksi telah berhasil mengelompokkan populasi asli Amerika menjadi haplogroup A, B, C, dan D (Torroni, et., al 1992).
Metode RFLP tidak menggunakan urutan nukleotida mtDNA manusia lengkap ( pb) dalam menentukan haplogroup Penentuan haplogroup dengan RFLP hanya menggunakan daerah-daerah tertentu dari urutan nukleotida mtDNA Contoh : daerah HVS I dan HVS II, daerah pengode (Coding region) Reanalisis untuk haplogroup RFLP Latar Belakang
Untuk melihat kesesuaian antara haplogroup RFLP dengan haplogroup yang ditentukan berdasarkan posisi mutasi dari urutan nukleotida lengkap menggunakan empat belas enzim restriksi endonuklase secara insilico
Mitokondria : organel sel eukariot organ respirasi ATP Mitokondria Sifat genetik sendiri (mtDNA) Polimorfisme yang tinggi laju mutasi tinggi Pola pewarisannya spesifik, hanya dari ibu Sistem kode genetik mtDNA berbeda dengan kode genetik DNA inti
DNA mitokondria manusia telah ditentukan urutannya secara lengkap oleh Anderson, 1981 Urutan ini dijadikan referensi atau acuan bagi penelitian- penelitian mtDNA : Cambridge Reference Sequence (CRS). mtDNA manusia tersusun atas bp. Genom mtDNA mengandung 37 gen yang terdiri atas 13 gen penyandi protein yang terlibat dalam fosforilasi oksidatif, 22 gen menyandi tRNA dan 2 gen menyandi rRNA (Arderson et al., 1981). Tinjauan Pustaka
RFLP : analisis urutan DNA yang dipotong oleh enzim restriksi yang diketahui, enzim restriksi akan memeotong DNA pada lokasi yang tidak saling berhubungan. Mutasi RFLP dilihat : hilangnya sisi pemotongan dari enzim restriksi tertentu(Loss) atau munculnya sisi pemotongan baru dari enzim restriksi (gain), yang dibandingkan dengan CRS Haplogroup :cara pengelompokan berdasarkan perbedaan panjang pendeknya fragmen mtDNA yang dipotong oleh enzim resriksi Tinjauan Pustaka
1. 2. Program MMA Metode RFLP Loss (-) Gain (+) Haplogroup Urutan nukleotida lengkap mtDNA Jenis dan posisi mutasi Haplogroup Teoritis Informasi tentang RFLP Informasi ttng RFLP
Jumlah HaplogroupJenis haplogroupJumlah individuSama dengan RFLPTidak sama dengan RFLP Satu haplogroup H dan F H=120 & F = Dua haplogroup EH, HL, HV, HI, HU, HX, FH, DE ( 48, 46, 21, 5, 2, 2, 2, 2, 1 ) Tiga haplogroup HJT, HIL, EHL, DEH, CEH FHI, ( 80, 16, 15, 5, 2, 1) Empat haplogroup FHJT, HJLT, EHIL, EHJT, AEHL, FHIL (19, 4, 3, 1, 1, 1) individu
Dari 584 individu yang dianalisis : Yang sama dengan haplogroup RFLP :344 individu Yang tidak sama dengan haplpgroup RFLP :66 individu Yang tidak termasuk kehaplogroup manapun : 97 individu Terdapat 77 individu yang belum diketahui suku bangsanya Dari semua sampel yang dianalisis yang paling sesuai adalah individu yang memiliki satu haplogroup, yang lainnya tidak menunjukkan hasil yang spesifik