GENE GUN Agustina Setiawati.

Presentasi berjudul: "GENE GUN Agustina Setiawati."— Transcript presentasi:

1 GENE GUN Agustina Setiawati

2 PENDAHULUAN Metode transformasi dgn cara menembak sel target dengan microcarrier yg diselubungi DNA Nama lain: BIOLISTIC (Bioballistic) TRANSFORMATION It was designed by John Sanford at Cornell University in 1987

3 The Helios Gene gun BIORAD
Particle Inflow Gun (PIG) PDS-1000/He The Helios Gene gun BIORAD

4 Aplikasi dalam terapi gen EX VIVO
Sel target: kulit, liver dan otak

5 Syarat Microcarrier Mempunyai massa yg cukup utk menghasilkan energi yg cukup menembus sel Biasanya unsur logam (emas, tungsten, palladium, rhodium, platinum, iridium) Inert terhadap reaksi dgn DNA dan bagian sel Diameter μm supaya sistem dispersinya baik

6 STEP 1 Partikel emas/tungsten diselubungi dgn DNA target cara:
Emas/tungsten dalam larutan PEG atau spermidin diinkubasi bersama larutan DNA dalam CaCl2

7 STEP 2 Micropartikel-DNA dialirkan dgn gas helium (He) melalui stop screen dlm kondisi vakum Pada stop screen, mikropartikel-DNA diuapkan dgn cara pemanasan sehingga terbentuk dispersi padat. Dgn kecepatan tinggi, mikropartikel DNA ditembakkan dalam sel target

8 Efisiensi Transformasi
Dipengaruhi oleh faktor-faktor: Tipe sel Kondisi pertumbuhan sel: medium Gene gun yg digunakan Skill

9 Mekanisme transformasi

10 Kelebihan Dapat diaplikasikan ke dalam berbagai macam sel
Proses dapat dimodifikasi

11 Kekurangan Mahal (peralatan & microcarrier)
DNA masuk secara random ke dalam sel (sitoplasma, nukleus, RE dsb) DNA yg masuk dalam sel tidak terproteksi

12 TERIMA KASIH