Oleh: Anne Carolina ( ) Eka Wulandari ( )

Presentasi berjudul: "Oleh: Anne Carolina ( ) Eka Wulandari ( )"— Transcript presentasi:

1 Oleh: Anne Carolina (20504011) Eka Wulandari (20504012)
HEME SPIN RENDAH SITOKROM OKSIDASE C SEBAGAI PENDORONG PROSES POMPA PROTON Oleh: Anne Carolina ( ) Eka Wulandari ( )

2 Sitokrom C Oksidase Enzim kunci pada respirasi aerob
Mengkatalisis transfer elektron dari sitokrom c ke oksigen Terdiri dari subunit I dan II Memiliki empat kofaktor redoks aktif: - CuA, CuB, heme a, heme a3

3 Sitokrom c oksidase Struktur Sinar-X (2.3 dan 2.35 Å )menunjukkan adanya pergerakan Asp-51 Subunit I dari interior protein menuju permukaan mitokondria Bentuk teroksidasi Asp-51 berkontak dengan matriks melalui ikatan hidrogen  air dapat melewati ruang dalam matriks Asp-51 berperan dalam proses pompa proton

4 Mutasi Asp-51 memberikan satu alternatif untuk menjelaskan fungsi Asp-51. Dalam penelitian ini akan dijelaskan peranan jalur H melalui site directed mutagenesis, struktur Sinar-X dan spektroskopi infra merah.

5 Fosforilasi Oksidatif
Oksidatif  oksigen molekular penerima elektron terakhir Terjadi hanya pada kondisi aerob Berlangsung dua tahap : 1.Siklus TCA 2.Sintesis ATP pada rantai transport elektron

6 Prinsip Utama fosforilasi oksidatif
Pembawa elektron utama adalah kompleks I, III, IV Membran mitokondria impermeabel terhadap protonpemompaan proton menimbulkan perbedaan potensial elektrokimia Potensial elektrokimia mendorong sintesis ATP

7 Transport Elektron di Mitochondria
                                                                                                             

8 Metodologi Penelitian
Site directed mutagenesis dengan western blot Pemurnian dan kristalisasi sitokrom c oksidase hati sapi Penentuam struktur enzim dengan Sinar-X dan FTIR

9 Mutasi Asp-51Asn Hasil SDS PAGE

10 Hasil Blue Native PAGE

11 Aktivitas transfer elektron & pompa proton

12 Struktur Sinar-X

13 Struktur Sinar-X

14 Struktur Sinar-X

15 Representasi perubahan konformasi saluran air

16 Mekanisme Proton-Pumping

17 Kesimpulan 1. Asp51Asn dari enzim hati memperlihatkan fungsi pompa proton tanpa mempengaruhi aktivitas reduksi dioksigen 2. Struktur Sinar-X (resolusi 1.8/1.9 Å dalam bentuk teroksidasi dan reduksi penuh) menunjukkan bahwa muatan positif total yang dibentuk selama oksidasi mendorong transport proton aktif dari ruang mitokondria ke Asp-51 melewati enzim lewat saluran air dan jaringan ikatan hidrogen, yang berlokasi di tandem. 3. Hasil infrared mengindikasikan bahwa konformasi Asp-51 dikontrol hanya oleh bentuk oksidasi heme spin rendah. Hasil ini mengindikasikan bahwa heme spin rendah mendorong proses pompa proton.