STERILISASI ALAT DAN PEMBUATAN MEDIA AGAR PRAKTIKUM BIOINDUSTRI Fitriyah 125100301111008 KELOMPOK 08

Alat dan Bahan Autoklaf Bunsen Hotplate Kompor Rak dan tabung reaksi Gelas ukur Timbangan digital Alkohol 95% Tisu Agar bacteriological Lakto fenol Aluminium foil Kertas payung Karet Plastik petromax Kapas

TAHAPAN STERILISASI ALAT Adapun langkah-langkah untuk sterilisasi alat meliputi: 1.) Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan 2.) Semprot alat dengan Alkohol 3.) Bersihkan dengan lap sampai bersih 4.) Bungkus dengan kertas Cokelat 5.) Masukkan dalam plastik pertomax 6.) Ikat dengan Karet 7.) Selanjutnya, siapkan Autoklaf dan diisi dengan air

8. ) Masukkan alat yang akan disterilisasi 9 8.) Masukkan alat yang akan disterilisasi 9.) Panaskan dengan menggunakan kompor 10.) Tunggu hingga suhu mencapai 121,1oC 11.) Kemudian tunggu 15 menit dengan suhu konstan 121,1oC 12.) Dinginkan sampai suhu 0oC 13.) Dan keluarkan Alat dari Autoklaf

Pada sterilisasi, alat yang akan disterilisasi harus terlebih dahulu disterilkan dengan alkohol(pada cawan petri). Kemudian disiapkan pula kapas, tabung reaksi, kertas coklat, plastik petromax, karet gelang. Setelah semua dibersihkan dengan alkohol, cawan petri dibungkus dengan kertas colklat dengan cara melipatnya pada cawan tersebut. Sedangkan tabung tersebut diberi tutup dengan kapas hingga rapat dan dapat dipastikan udara tidak dapat masuk dalam tabung. Setelah semua diakukan, keduanya dimasukkan kedala plastik petromax yang berfungsi sebagai bahan yang tahan akan uap.

Pada kertas cokelat untuk pembungkusan terdapat dua sisi, yaitu sisi halus dan sisi yang kasar. Pada sisi yang halus diletakkan pada bagian atas pembungkusan. Hal ini bertujuan untuk meminimalisir air dari luar tabung dan untuk menahan uap air masuk dalam tabung reaksi. Sedangkan bagian kasar dibungkuskan dibagian bawah (wadah) dengan tujuan agar dapat menyerap uap maupun air yang terdapat pada bagian dalam tabung atau cawan petri.

TAHAPAN PEMBUATAN MEDIA AGAR Sebelumnya, perlu diketahui bahwa dalam pembuatan media agar ini digunakan 2 perlakuan yaitu dibuat media agar tegak dan media agar miring. Adapun langkah-langkah pembuatan media agar sebagai berikut: 1.) Timbang Agar Bacteriological sebanyak 0,672 gr 2.) Masukkan ke dalam gelas ukur 3.) Aduk 4.) Panaskan dengan menggunakan hotplate 5.) Masukkan dalam tabung reaksi 7 ml 6.)Tutup dengan kapas

7. ) Bungkus dengan kertas cokelat 8 7.) Bungkus dengan kertas cokelat 8.) Masukkan dalam plastik petromax 9.)Ikat dengan menggunakan karet 10.) Kemudian, masukkan dalam autoklaf 11.)Panaskan dengan kompor 12.) Tunggu sampai suhu 121,1oC 13.) Tunggu 15 menit dengan suhu konstan 121,1oC 14.) Dinginkan hingga suhu 0oC 15.) Keluarkan media agar

STERILISASI MEDIA AGAR Fungsi penambahan aquades digunakan untuk mengencerkan larutan, penambahan aquades ini mengakibatkan konsentrasi berubah dan volume diperbesar tetapi jumlah mol zat terlarut tetap. Sedangkan pemanasan dengan hotplate seperti biaasa digunakan agar dapat membuat larutan tercampur secara homogen.

Pada pembuatan sterilisasi media agar periksa dulu banyak air dalam autoklaf, kemudian dimasukkan media yang akan disterilkan yang ditutup dengan sekrup pengaman pada autoklaf. Lalu nyalakan api pada kompor. Pada saat autoklaf ditletakkan diatas kompor, katup uap dibiarkan terbuka hingga udara diganti uap. Setelah uadara terganti oleh uap katup uapnya ditutup.

Kemudian distterilisasi medianya sekitar 15-20 menit, kemudian matikan apinya dan dibiarkan menurun tekanannya hingga nol. Dibuka tutup autoklafnya,lalu diambil tabungnya dengan sarung tangan tahan panas.Kemudian memasukkan kertas sporestrip dalam autoklaf dan dilakukan sterilisasi. Pada proses tersebut, dimasukkan sporestrip dalam dextrose tryptone broth yang diinkubasi pada suhu 55-60oC. Kemudian diamati perubahannya.

Pada pembuatan media agar perlu didiamkan selama 24 jam setelah proses strelisasi agar supaya media dapat berkembang sehingga nantinya media dapat membentuk tekstur seperti agar dan pendiaman ini juga dilakukan karena mikroba atau bakteri dapat berkembang biak dengan cepat dan baik dalam waktu 24 jam.

GAMBAR HASIL STERILISASI ALAT

GAMBAR HASIL MEDIA AGAR