PEMBUATAN MEDIA DAN STERILISASI LIA HIDAYATI 125100301111030 KELOMPOK 7

Pengertian Sterilisasi adalah cara untuk mendapatkan suatu kondisi bebas mikroba atau proses yang dilakukan baik secara fisika, kimia,dan mekanik untuk membunuh semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme Medium (media) adalah substansi yang terdiri atas campuran zat-zat makanan (nutrien) yang dipergunakan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan mikroorganisme

Medium berdasarkan fungsinya Medium umum: Medium yang ditambahkan bahan-bahan yang bertujuan menstimulasi pertumbuhan mikroba secara umum. Medium khusus: Medium untuk menentukan tipe pertumbuahn mikroba dan kemampuannya untuk kemampuannya untuk mengadakan perubahan-perubahan kimia tertentu misalnya medium tetes tebu. Media diperkaya: Media yang ditambahkan bahan-bahan tertentu untuk menstimulasi pertumbuhan mikroba yang diinginkan. Media selektif: Media yang ditambahkan bahan-bahan tertentu yang akan menghambat pertumbuhanmikroba yang tidak diinginkan yang ada dalam suatu spesimen

Media (lanjutkan) Media diferensial: Media yang ditambahkan bahan-bahan kimia atau reagensia tertentu yang menyebabkan mikroba yang tumbuh memperlihatkan perubahan-perubahan spesifik sehingga dapat dibedakan dengan jenis lainnya Medium penguji: Medium dengan susunan tertentu yang digunakan untuk pengujian senyawa-senyawa tertentu dengan bantuan bakteri. Medium perhitungan jumlah mikroba: Medium spesifik yang digunakan untuk menghitung jumlah mikroba dalam suatu bahan.

Alat dan Bahan Alat Cawan petri Plastik petromax Kertas coklat Karet Autoklaf Kompor Tabung reaksi Kapas Bahan Alkohol Aquades Agar bacteriological

Sterilisasi Alat Alatnya dibersihkan terlebih dahulu dengan alkohol Lalu dilap dengan tisu/kapas Dibungkus dengan kertas coklat Di masukkan dalam plastik petromax Diikat dengan karet Disiapkan autoklaf dan isi air Dipanaskan dengan kompor ditunggu hingga suhu 121,10C,

Sterilisasi Alat (Lanjutan) Disiapkan autoklaf dan isi air Dipanaskan dengan kompor ditunggu hingga suhu 121,10C, Ditunggu 15 menit dengan suhu konstan. Di dinginkan sampai suhu 00C

Pembuatan media agar Ditimbang dengan berat 0,672 gram Diberi Aquades mendidih 42ml Dimasukkan gelas ukur lalu diaduk Dipanaskan dengan hotplate Di masukkan tabung reaksi 7ml Ditutup dengan kapas Di bungkus kertas cokelat Di masukkan plastik petromax

Pembuatan media agar (lanjutan) Diikat dengan karet Di masukkan Autoclave Dipanaskan dengan kompor Ditunggu sampai suhu 121,10C Ditunggu 15 menit Dicatat Hasil

Metodologi Pembuatan Media Agar Siapkan alat dan bahan, lalu penimbangan agar bacterial, agar tersebut dimasukkan gelas beaker dan ditambahkan air mendididh (aquades) 42ml. penambahan air mendidih ini berfungsi untuk melarutkan agar. Kemudian panaskan di atas hotplate. Pemanasan ini berfungsi untuk menghomogenkan antara agar dan aquades yang ditambahkan.             Pada pembuatan media agar, setelah diproses sterilisasi didiamkan selama 24 jam dengan tujuan agar bakteri dapat tumbuh pada medium yang cocok.

Metodologi Sterilisasi Alat Sebelum melakukan praktikum, alat yang akan digunakan harus dilakukan sterilisasi terlebih dahulu dengan tujuan agar mikroba-mikroba yang menempel pada alat tersebut hilang/mati, sehingga alat tersebut steril dan tidak terkontaminasi oleh mikroba-mikroba ketika digunakan. Suhu sterilisasi yang konstan adalah 121,10C dikarenakan suhu tersebut membuat semua mikroba mati, akan tetepi masih ada beberapa mikroba yang masih tahan panas. Gunakan suhu yang telah ditentukan tersebut guna bahan/peralatan jauh atau tidak ada bakterinya yang tinggal di tempat tersebut. Pada sterilisasi cawan petri dan tabung reaksi, alat tersebut dibungkus dengan menggunakan kertas cokelat, disini fungsi kertas cokelat tersebut sebagai penahan UAP air yang memungkinkan terjadi akibat pemanasan udara selama proses sterilisasi. Letak penggunaaan ketas cokelat ini bagian halus kertas cokelat berada diluar, sedangkan yang kasar berada didalam, hal ini menyebabkan air sukar masuk pada pada media (tetap terjaga tanpa terjadi penambahan air dari luar).

Metodologi (lanjutan) Penyemprotan alcohol pada media pun perlu dilakukan dengan tujuan untuk membersihkan alat dan menjadikan alat apseptik, dengan kata lain menghilangkan mikroba dari alat. Pembilasan/dilap menggunakan tissue yaitu dengan tujuan membersihkan bekas cairan alcohol dan mengangkat bakteri/mikroba yang ada. Cara melakukannya pembilasannya pun harus dengan satu arah, tidak boleh bolak-balik arah, agar meminimkan terkontaminasi bakteri yang telah diakut.

KESIMPULAN Pada praktikum pembuatan media digunakan agar bakteorogical yang dilarutkan dalam aquades serta dipanaskan untuk memperoleh pelarutnya. Selanjutnya media disterilkan dan diamkan selama 24 untuk memperoleh pertumbuhan bakteri, namun sebelum pembuatan media agar alat yang digunakan seperti cawan petri dan tabung reaksi harus lebih dahulu di sterilkan. Hal ini bertujuan agar dalam penumbuhan bekteri dalam media agar tidak terkontaminasi oleh mikroorganisme lain yang diinginkan. Suhu yang digunakan dalam sterilisasi adalah 121,10C pada tekanan 1atm supaya bakteri mati hingga spora-sporanya.

TERIMA KASIH