PRAKTIKUM MEKANISME DASAR PENYAKIT Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin 2014

Tata tertib 1. Pada saat praktikum, Mahasiswa mempersiapkan : - Jas praktikum - Pensil warna - Penuntun praktikum 2. Selama berada didalam laboratorium, tidak diperbolehkan untuk makan, minum, merokok dan menggunakan alat kosmetik. 3. Tidak melepas dan memakai kembali kontak lensa. 4. Bekerja dengan hati-hati.

MIKROSKOP

Lensa okuler

Lensa Objektif

Kondenser

Mechanical stage

Focus

PEWARNAAN BAKTERI

Pewarnaan Sederhana Dikatakan sederhana karena hanya menggunakan 1 zat pewarna. . Zat warna basic yang paling sering digunakan untuk pewarnaan sederhana adalah methylen blue, crystal violet, dan carbol fuchsin. Tujuan: Morfologi Koloni Prinsip: Bakteri=latar=warna sama --warna bakteri lebih gelap Fuchsin/Safranin Methylen Blue 10

PEWARNAAN NEGATIF Praktis, tidak perlu fiksasi dengan panas dan tidak ada pengaruh bahan kimia Zat warna acidic dgn chromogen bermuatan negatif, tidak bisa penetrasi ke dalam sel Latar belakang berwarna Tujuan : morfologi dan koloni Zat warna : Tinta India (negrosin)

Pewarnaan Negatif Kenapa bisa latar hitam??? Karena yang digunakan adalah tinta cina/india ink yang tdk mampu berdifusi ke dalam bakteri coccus streptobasil 15

Pewarnaan Differensial Pewarnaan Gram Pewarnaan Tahan Asam Pewarnaan Kapsul Pewarnaan Spora

PEWARNAAN GRAM Merupakan pewarnaan diferensiasi Tujuan : Morfologi, koloni, dan sifat gram 4 reagensia Zat warna primer : Crystal Violet Mordant : Lugol atau Gram’s Iodin Peluntur : Ethyl Alkohol 96% Zat warna kontras : safranin atau larutan Fuchin

PEWARNAAN GRAM Gram Positif  Dinding peptidoglikannya tebal  Mengikat zat Warna Pimer (diperkuat oleh mordant)  tidak luntur oleh peluntur  tidak terpengaruh zat warna kontras Gram Negatif  Tidak bisa mengikat kuat zat warna primer  warna primer luntur dengan alkohol  Zat warna kontras mendominasi

Contoh bakteri : Gram+ Gram- Streptococcus Pyogenes E.Coli Staphylococcus Aureus Salmonella spp. Bacillus Cereus Shigella spp

Gram Positif

Gram Negatif

PEWARNAAN KAPSUL Untuk melihat kapsul dari bakteri Ada 2 metode : Burry-Gins dan Tyler

Burry-Gins Tujuan: Morfologi Koloni Sifat=untuk melihat kapsul Bakteri berkapsul  bakteri patogen 2 reagensia: Zat warna primer : Tinta India / Negrosin Zat warna kontras : Safranin / air fuchin 25

PEWARNAAN TAHAN ASAM (ZIEHL – NEELSEN) Tujuan : morfolgi, koloni, sifat tahan asam Bakteri tahan asam: Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium leprae Pewarna: Primer : Carbol Fuchin (dipanaskan) Peluntur : Alkohol asam ( Ethanol 95% + HCl 3%) Kontras : Methylen Blue

PEWARNAAN SPORA Untuk melihat spora bakteri Pewarna: Primer : Carbolfuchsin Ziehl Neelsen, pemanasan Zat peluntur : Asam sulfat 1% Kontras : Methylen blue 1% Contoh basil berspora: Bacillus cereus Bacillus anthracis

TERIMA KASIH