oleh Werdi Isna Retnowati Pembimbing Fida Madayanti W, Ph.D Pengembangan Isolasi Minyak Atsiri dari Daun Nilam Pogostemon cablin Benth dengan praproses Fermentasi oleh Werdi Isna Retnowati Pembimbing Fida Madayanti W, Ph.D Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Teknologi Bandung 2010

AGENDA PRESENTASI 1 Pendahuluan 2 Tinjauan Pustaka 3 Strategi Penelitian 4 Hasil Penelitian 5 Kesimpulan 2

PENDAHULUAN Tujuan Penelitian Kebutuhan pasar dunia meningkat 6% tiap tahunnya Minyak atsiri penymbang terbesar Devisa negara Praproses fermentasi meningkatkan kadar minyak nilam

TUJUAN PENELITIAN Mendapatkan mikroorganisme unggul untuk digunakan dalam praproses fermentasi nilam Mendapatkan minyak atsiri dari daun nilam (Pogostemon cablin Benth) dengan kadar minyak yang memuaskan

STRATEGI PENELITIAN Nilam Kompos Isolasi Mikroba Karakterisasi Kandidat utama Fermentasi Isolasi DNA Kromosom PCR Identifikasi jenis Isolasi Minyak Nilam GC Nilam

KESIMPULAN Telah didapatkan mikroorganisme unggul yang dapat digunakan dalam praproses fermentasi Dengan praproses fermentasi menggunakan mikroorganisme tersebut, diperoleh yield minyak nilam 6,51 kali lipat lebih banyak dibandingkan dengan isolasi tanpa fermentasi Identifikasi mikroorganisme dan isolasi nilam dengan destilasi uap masih berlangsung

SEKIAN TERIMA KASIH

Isolasi Mikroorganisme (Koloni Tunggal) KOMPOS Sampling 1ml suspensi, sentrifuge Suspensi Kompos Pengenceran 1-12x Sebarkan pada media padat Koloni campuran Pada pengenceran tertentu akan didapatkan beberapa koloni berbeda

Ekspresi Enzim NB/PDA Media CMC Media CaCl2 Media Nilam Media Kaya

Identifikasi Jenis Mikroba STRATEGI PENELITIAN Identifikasi mikroba Kandidat Utama Isolasi DNA Kromosom PCR Sequencing Identifikasi Jenis Mikroba

TINJAUAN PUSTAKA 18S rRNA rRNA  komponen utama pada ribosome, mengkode mRNA menjadi asam amino Gen yang mengkode rRNA  identifikasi spesies Type Large Subunit Small Subunit Prokaryot 5S, 23S 16S Eukaryot 5S, 5.8S, 28S 18S

Hasil PCR 1419pb 514pb 396pb 214pb Isolasi DNA Kromosom Primer Urutan (5’  3’) Posisi Annealing Euk 1209F CAGGTCTGTGATGCCC 1423-1438 Uni 1392R GACGGGCGGTGTGTAC 1641-1627 Jumlah Basa 219 Hasil PCR 1419pb 514pb 396pb 214pb Isolasi DNA Kromosom

TINJAUAN PUSTAKA NILAM Pogostemon cablin Benth/ Nilam aceh Pogostemon heyneanus Benth/ Nilam hutan atau Nilam jawa Pogostemon hortensis Backer/ Nilam sabun http://id.wikipedia.org/wiki/Nilam

TINJAUAN PUSTAKA Minyak Nilam Komponen utama: Patchouli alkohol dan norpatchoulenol Kegunaan: zat fiksatif

TINJAUAN PUSTAKA Isolasi Minyak Atsiri Destilasi Uap

STRATEGI PENELITIAN Isolasi Minyak Nilam Kandidat Utama FERMENTASI Destilasi Uap Ekstraksi Gas Chromatography Daun Nilam Isolasi Minyak Nilam Destilasi Uap Ekstraksi Gas Chromatography

Fermentasi Starter Mikroba diremajakan dalam media kaya selama 18 jam pada 37o C; 150rpm Media adaptasi nilam Medium adaptasi terdiri dari 20%starter dan 80%slurry nilam (nilam:aquadest = 1:10]) Inkubasi selama 18 jam pada 37o C; 150rpm Fermentasi Fermentasi dilakukan dengan menyebarkan 10% media adaptasi ke dalam daun nilam steril Inkubasi selama selama 36 jam pada 37o C; dengan pengocokan berkala tiap 2 jam

Ekstraksi 2 tahap Minyak Hasil Fermentasi: 2,15mL (4,3%) Minyak tanpa Fermentasi: 0,33mL (0,66%) Tanpa Fermentasi:Fermentasi = 1:6,51

Nilai 10 dari skala 1-10 untuk Aktivitas selulase tinggi   CMC CaCl2 Nilam Kaya TOTAL NB A 8 6 9 1 24 B 0.6 24.6 C 2 0.9 20.9 D 7 25 E F G 20 H 5 23 I 21.9 J 16.6 K 3 0.5 14.5 L M N 21.5 PDA 21 22 Nilai 10 dari skala 1-10 untuk Aktivitas selulase tinggi Nilai 1 dari skala 1-10 untuk Aktivitas lipase tinggi Nilai 10 dari skala 1-10 untuk kemampuan tumbuh dalam media nilam Didapatkan 4 Kandidat Unggul: KNB-f, KNB-d, KNB-a, dan KNB-b