DNA FINGERPRINT Struktur DNA: Sidik jari (1930)----- Sidik DNA (1989) - Sidik jari dapat diubah dengan di operasi Sidik DNA: - Ada pada semua jaringan - Tidak dapat diubah Struktur DNA: Struktur molekul: C (cytosin) G (guanin) A (adenin) T (thymin) 2. Bangunan dasar nukleotida: - gula/sugar - desoksiribosa - kelompok phosphat - 4 nitrogen dasar berpasangan: A-T; C-G; G-C; T-A;

Determinasi @ Segmen DNA dideterminasi dari pasangan gula phosphat @ DNA membedakan : - Karakter - Organisme - Individu

Nucleotida (asam amino)

Chromosome

Chromosome

Kromosom Lengan pendek (p) Lengan panjang (q)

Analisis DNA Isolasi DNA: darah, rambut, kulit, sperma dsb Memotong mengukur dan mensortir (restriksi): dengan enzim restriksi asal bakteri: mis Eco RIpada sequen GAATTC 3.- Elektroforesis gel - Transfer DNA ke nylon 4. Probing: -dengan radioaktif- DNA.FP - Pewarna probDNA.FP 5. DNA. FP dengan pewarna prob lagi

Sidik DNA Setelah proses elektroporesis, kemudian Diwarnai: Dengan methylen blue untuk pewarnaan gel Konvensional Pewarnaan khusus untuk peningkatan penampilan Dan memudahkan pembacaan, dapat diwarnai : Dengan: - Carolina blue, atau - Quikviem DNA Kedua jenis pewarnaan ini dapat mengurangi Back ground dan meningkatkan sensitiviti

POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) Reaksi penggandaan DNA: Diperlukan: - DNA original - dua molekul primer nukleotida utuh - larutan buffer - Taq DNA polimerases (enzim): Fungsi/kegunaanya: - Melipatgandakan DNA dengan cara mengkopi(copy) - Diagnosis untuk mengkonformasi DNA

Proses PCR Denaturasi annealing primer Replikasi DNA

Denaturasi (suhu 94-96oC) Dobel helix strand dipisah

Annealing Primer (suhu 50-65oC) annealing/primer melekat pada masing-masing strand

Replikasi DNA (suhu 72oC) masing-masing strand digandakan

Aplikasi DNA FP Mendiagnosis Kelainan keturunan (genetik) - pada janin yang belum dilahirkan - Bayi yang baru dilahirkan Penelitian mengenai kelainan genetik Normalbandingkan --Kelainan Bukti biologik: untuk laboratorium forensik

Penyakit Genetik Gen makhluk hidup Ling-kungan

Klasifikasi penyakit genetik

Achondroplasia

ENZIM UNTUK RESTRIKSI Enzim Organisme sequen yang dikenal ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- EcoRI Escherichia coli GAATTC BamHI Bacillus amyloliquefaciens GGATCC Bgl/II bacillus globigii AGATCT PvuII proteus vulgaris CGATCG PvuIII Proteus vulgaris CAGCTG HindIII haemophilus influenzaeRd AAGCTT HinfI Haemophilus influenzaeRf GANTC Sau3A Staphylococcus aureus GATC AluI Arthrobacter luteus AGCT TaqI Thermus aquatus TCGA HaeIII haemophilus aegyptius GGCC NotI Nocardia otitidis-caviarum GCGGCCGC

Mutasi DNA

Kelainan keturunan

Kasus perselingkuhan (hal. 51)

Kasus perkosaan (hal 52)

Kasus perkosaan (hal. 53)

MINI-SATELIT Variable Number Tandem Repeat (VNTR) Pada kromosom manusia ada sequens pendek yang diulang Ulangan : dari 1-30 ulangan Dapat dipotong pada variasi jumlah tandem repeat: dengan cara hibridisasi dan probe spesifik “TAAGGGCCATAAGGGCCATAAGGGCCA”

VNTR

VNTR Ayah Ibu Ayah ---------------Anak------------------ Ibu

VNTR Single locus: memperlihatkan locus-tunggal probe VNTR sangat mudah diinterpretasikan untuk setiap individu dengan band yang tidak lebih dari dua Digunakan di Amerika untuk penyidikan forensik dan jejak keturunan Multi locus: Memperlihatkan locus-multi probe VNTR, banyak informasi yang dapat dibaca secara simultan dengan band antara 10-30 Tetapi agak susah interpretasinya Digunakan di Eropa untuk penyidikan forensik dan jejak keturunan