Planar Kromatografi

SORBENT (Penyerap) Paper Chromatography : - α-selulosa - Untuk pemisahan senyawa lipofilik, selulose sering dimodifikasi dg » esterifikasi » direaksikan dengan silicone

Thin Layer Chromatography : TLC Thin Layer Chromatography : Silica Gel - paling banyak digunakan Alumina - untuk pemisahan : » vitamin larut lemak » alkaloid » antibiotik

BONDED SILICA

T L C Bagaimana Mekanisme Pemisahan ???

Lipophilic Silica gel

Silica gel and polar surface-modified

Mekanisme pemisahan

Thin-Layer Chromatography Apa yang dimaksud : Silica gel 60 GF254 atau Silica gel 60 G UV254 Silica gel 60 F254 atau Silica gel 60 UV254 Silica gel 60 GF366 atau Silica gel 60 UV366

Silica Gel 60 GF254 Adalah Silica Gel dengan : Ukuran pori : 60 Å G = CaSO4.½ H2O sebagai binder F = bahan fluorescen / fosforescen yg ditambahkan 254 = dituliskan sesudah F atau UV utk menandakan λ eksitasi bahan fluorescen atau fosforescen yang ditambahkan (Adamovics, 1997; Jork dkk., 1990)

Fluorescen dan Fosforescen indikator Fluorescen & fosforescen, keduanya merupakan bentuk luminescen Fluorescen - terdiri dari senyawa organik - radiasi emisi rusak dlm 10- 8 detik stlh radiasi eksitasi dihentikan - disertakan pd lap. penyerap dg jalan menyemprotkan atau mencelupkan Fosforescen - terdiri dari senyawa anorganik - radiasi emisi rusak lebih dari 10- 8 detik sesudah radiasi eksitasi dihentikan - disertakan pd lap. penyerap secara homogen (Jork dkk., 1990)

Luminescence

Organics Fluorescence Indicators ( F366 ; UV366 ) Natrium 3 – hidroksipiren – 5,8,10 – trisulfonat Natrium 3,5 – dihidroksipiren – 8,10 – disulfonat Natrium fluorescein ; fluorescein atau 2’,7’ – diklorofluorescein Rhodamin, Rhodamin 6 G Morin Zat warna Cyanin Derivat stilben (misal: diaminostilbentriazin) Pencegah optik (ultraphor WT BASF) Calcofluor R – white, Leukophor (Jork dkk., 1990)

Inorganic Phosphorescence Indicators Kode : UV254 Warna Senyawa Yg di + kan 1. Biru - Senyawa strontium yg diaktivasi dg Sn 2. Kuning - Uranil asetat 3. Hijau kuning - Seng silikat yg diaktivasi Mn - Seng kadmium sulfat 4. Senyawa - senyawa pengemisi pada λ 254 nm (Jork dkk., 1990)

TLC Scanner Plate TLC

Teofilin

Teobromin

Proses Scanning Scan Kuantitatif

O -Phthalaldehyde reagent

DERIVATISASI H2N-R + +

Humidity Effect Relative humidity (%) Chromatogram of dyestuff mixture (according to Rf values) Sudan Red 7B, Sudan orange G, Sudan black B, Sudan yellow, Artisil blue 2RP, and Sudan black B (2 components)

Aplikasi Sampel

Mana yg lebih baik ?

Pita atau Spot

Keuntungan penggunaan pita

Flavonoids Densitogram Ekstrak Solidaginis Ekstrak Hyperici Ekstrak Betulae Densitogram Standard Standard

Penggunaan Alat

TLC preparatif

Impregnasi lempeng

Prewashing

Prewashing Old layer

Tipe kromatografi

Bagaimana mengatasinya Tailing Apa penyebabnya Bagaimana mengatasinya ???

Tips pengatasan

Bagaimana yang terbaik Penggunaan eluen Berapa kali ulangan eluen /campuran pengembang dapat digunakan Bagaimana yang terbaik ???

TLC-Curcuminoids [ Curcuma longa L. ] TLC fingerprint of the extracts from all extraction methods, using: Staionary phase : Silica gel GF254 Mobiole phase : Chloroform : Benzene : Methanol ( 85 : 15 : 5 ) Figure 3: Curcumin, demethoxycurcumin, bis-demethoxycurcumin

C DMC BDMC