Teknologi dna rekombinan

Slides:



Advertisements
Presentasi serupa
Gene Regulation Drs. Sutarno,MSc., PhD..
Advertisements

Prof. Drs. Sutarno, MSc., PhD.
Kontrol ekspresi gen pada eukaryot
Prof. Drs. Sutarno,MSc., PhD.
Dasar-dasar Pengklonan gen
TEKNOLOGI DNA REKOMBINAN
Bio-mol kul ke Erlindha Gangga A
(Rekombinasi dan Regulasi)
DASAR-DASAR PENGKLONAN GEN
GEN DAN GENOM GENOM : SUATU ORGANISME YANG DAPAT
Teknologi DNA Rekombinan
Klasifikasi, Mekanisme dan Aplikasi Enzim DNA Ligase
Home Text lengkap Bahan Kuliah Biologi TPB-IPB
Teknologi DNA Rekombinan
Teknik Analisis Fragmen DNA Sebagai Dasar REKAYASA GENETIKA
OLEH SUDRAJAT FMIPA UNMUL 2009
JALUR INFORMASI GEN DAN KROMOSOM.
BLOK 1.1 DR.ETI YERIZEL,MS BIOKIMIA DAN BIOLOGIMOLEKULER
REKAYASA GENETIKA By: Ace Baehaki, S.Pi, M.Si.
EKSPRESI GEN & PENGENDALIANNYA
Aplikasi Teknologi DNA
GlossaryGlossary --- Reproduksi Sel --- Hereditas ---- Struktur Gen --- Regulasi Ekspresi Gen --- Genom ManusiaGenom Manusia PLASMID Teknologi DNA Disusun.
OLEH SUDRAJAT FMIPA UNMUL Struktur Sel Bakteri.
GENE THERAPY AN INTRODUCTION Agustina Setiawati, M.Sc., Apt.
Agustina Setiawati, M.Sc., Apt
EKSTRAKSI, purifikasi dan PRINSIP KLONING DNA
9.3 Geometric Sequences and Series. Objective To find specified terms and the common ratio in a geometric sequence. To find the partial sum of a geometric.
METODE MUTAKHR BIOTEKNOLOGI KULTUR JARINGAN KULTUR JARINGAN REKAYASA GENETIKA.
MACAM-MACAM PANDANGAN BIOTEKNOLOGI
Mekanisme Rekombinasi
PCR 21 Juni 2016.
MOLECULAR OF BIOTECHNOLOGY
Dr. Henny Saraswati, M.Biomed
REKAYASA GENETIKA.
Dr. Henny Saraswati, M.Biomed
Enzim Pemotong Asam Nukleat
RKPS: 2015 KONTRAK KULIAH (MATERI) GENETIKA
PLASMID Pada beberapa jasad, terutama pada kelompok prokariot, seringkali dijumpai bahan genetik tambahan selain bahan genetik utama yang ada dalam kromosom.
DNA NON INTI 1 Juni 2016.
Teknik Dasar Laboratorium untuk Bioteknologi
Regulasi Ekspresi Gen Pada Prokariot
TEKNOLOGI DNA REKOMBINAN
PEMBELAJARAN BERBASIS TEKNOLOGI INFORMASI.
Aplikasi Teknologi DNA
The first reason Sebab yang pertama.
Metabolisme asam nukleat II
DOGMA SENTRAL GENETIK.
Sintesis asam lemak Makanan bukan satu-satunya sumber lemak kita
MENGAPA PERLU PELAJARI GENETIKA?
PENETAPAN POTYVIRUS ISOLAT INDONESIA
“DNA REKOMBINAN”.
LIPOSOM Agustina Setiawati.
Bioteknologi Klasik Dan Modern
Pemotongan Dengan Enzim Restriksi Pembuatan cDNA Melalui Transposom
Semua makhluk hidup tersusun atas DNA
B I O T E K B I O T E K.
Jaka Julian Kusuma ( ) Muhammad Arief Akbar ( ) M.Yudhistira Putra ( )
Is it different ? HEREDITY SUBSTANCES HEREDITY SUBSTANCES.
DNA mengandung informasi
ISOLASI & KLONING GEN Makhziah, Ir.MP..
ANALISA SIKUEN GEN CP POTYVIRUS
Genomik, Genetik dan Biokimia Genetik: ilmu yang mempelajari tentang gen, pewarisan sifat/hereditas, dan variasi pada makhluk hidup. Genomik: ilmu yang.
MUTASI DAN PENYAKIT KETURUNAN
KONSTRUKSI PLASMID REKOMBINAN pQE30+CP[ToCV] UNTUK EKSPRESI PROTEIN CP
BLOK 1.1 DR.ETI YERIZEL,MS BIOKIMIA DAN BIOLOGIMOLEKULER
Metabolisme asam nukleat II
DNA mengandung informasi
Importance of Web Development Frameworks Frameworks, no doubt have become a crucial aspect of web development. In fact, many find the entire development.
2. Discussion TASK 1. WORK IN PAIRS Ask your partner. Then, in turn your friend asks you A. what kinds of product are there? B. why do people want to.
Rencana Perkuliahan Aliran Informasi Genetik Teknologi DNA Rekombinan PCR & Diagnosis Molekuler (Aplikasi PCR) Teknik Biologi Molekuler (UTS) Produksi.
Transcript presentasi:

Teknologi dna rekombinan Agustina Setiawati, M.Sc., Apt

Kloning DNA Cloning – the act of making many identical copies of a particular piece of DNA (often a gene) As you know, the first stop often involves joining a piece of DNA of interest to a cloning vector using DNA ligase

Prinsip DNA rekombinan

PEMOTONGAN HpaI

PEMOTONGAN EcoRI

LIGASI

VEKTOR KLONING

Plasmid DNA untai ganda sirkuler, ekstrakromosom Linier : Streptomyces rochei Ukuran : 2,2 kb – 700 kb Jumlah duplikat: 1-2; 4-8; 20-30, 700-1000.

Penamaan plasmid p : plasmid BR : pembuat Bolivar dan Rodriguez 322 dibuat lebih awal drpd pBR325, pBR328

Pembuatan Plasmid rekombinan

VEKTOR PLASMID pBr322

KLONING DENGAN VEKTOR pBR322

Deteksi adanya klon yang diinginkan

VEKTOR PLASMID puc18/19

Keuntungan pUC Jumlah duplikat 500 – 700 plasmid/sel Mudah mendeteksi % plasmid rekombinan Adanya polycloning sites pUC18 = pUC19, polycloning sitesnya berlawanan Membawa promoter lacUV dan ribosome binding site

Deteksi adanya klon yang diinginkan

Plasmid Polylinkers and Marker Genes for Blue-White screening A vector usually contains a sequence (polylinker) which can recognize several restriction enzymes so that the vector can be used for cloning a variety of DNA samples. Colonies with recombinant plasmids are white, and colonies with nonrecombinant plasmids are blue. Example: pUC19 Resistant to ampicillin, has (ampr gene) Contains portion of the lac operon which codes for beta- galactosidase. X-gal is a substrate of beta-galactosidase and turns blue in the presence of functional beta-galactosidase is added to the medium. Insertion of foreign DNA into the polylinker disrupts the lac operon, beta-galactosidase becomes non-functional and the colonies fail to turn blue, but appear white. DNA rekombinan pada plasmid

KEMUNGKINAN BERHASIL PERSAMAA CLARCK DAN CARBON N = ln(1 – P)/ln(1 – F) P : probalitas 0,99 F : ukuran sisipan/ukuran kromosom N : jumlah koloni dg plasmid rekombinan

Koloni yang dibutuhkan Ukuran kromosom 4.000 kb Ukuran rata-rata sisipan 7,7 kb N=ln(1-99)/ln(1-7,7/4000) = 2390 koloni Manusia 4x106 kb

Kloning gena isulin manusia Ukuran kromosom 4x109 pb Ukuran gena isulin 1.700 pb Ukuran sisipan 10.000 pb N = ln(1-0,99)/ln(1-104/4x109) Jika sisipan 40.000 pb N = ?

TRANSFORMASI

KLONING GENA EUKARIOT

STRATEGI KLONING GENA EUKARIOT Isolasi total mRNA dari jaringan ttt Ubah mRNA menjadi cDNA Sisipkan pada vektor ekspresi Penapisan klon Produksi enzim

RNA processing

Produksi Insulin Proinsulin

Preparasi cDNA Metode Berg JM, et al, 2002

Pembuatan cDNA

cDNA

DETEKSI PROTEIN PADA SEL HOST DENGAN PELACAK DNA

DETEKSI PROTEIN PADA SEL HOST

Want to know more? Just ask!

MATUR NUWUN