KELUARAN JANGKA PANJANG

Presentasi berjudul: "KELUARAN JANGKA PANJANG"— Transcript presentasi:

1 KELUARAN JANGKA PANJANG
Dihasilkan tanaman nilam transgenik tahan terhadap Potyvirus [yang menurunkan kehilangan hasil 35 persen] [Diharapkan petani nilam dapat menanggulangi penyakit mosaik yang dirasakan telah menjadi faktor pembatas dalam produksi nilam di Indonesia]

2 KELUARAN TAHUN BERJALAN
Tahun Pertama [2010]: Koleksi 15 isolat Potyvirus dari daerah sentra produksi nilam di Indonesia; Informasi mengenai karakter molekuler Potyvirus yang berasosiasi dengan tanaman nilam di Indonesia; Gen CP-Potyvirus yang sudah di isolasi; Plasmid vektor pCAMBIA 1301::PotyCP yaitu plasmid ekspresi [pCAMBIA1301] yang telah disisipi gen CP Potyvirus [PotyCP]. Teknik regenerasi tanaman nilam secara in vitro yang optimal.

3 METODOLOGI PENELITIAN
Penetapan Potyvirus Isolat Indonesia Penetapan dan Analisa Sikuen Gen CP Kloning Gen CP dan Kontruksi Kimera Plasmid Ekspresi 4. Optimasi Teknik Regenerasi Tanaman Nilam

4 PENETAPAN POTYVIRUS ISOLAT INDONESIA
SURVEI DAN KOLEKSI TANAMAN SAKIT Untuk mendapatkan tanaman nilam terinfeksi tunggal Potyvirus [digunakan sebagai sumber Potyvirus isolat Indonesia] Survei dilakukan di sentra produksi nilam Indonesia [Sumatera Utara, Sumatera Barat, Jawa Barat dan Jawa Tengah]

5 PENETAPAN POTYVIRUS ISOLAT INDONESIA
Enzyme-linked Immunoassay (ELISA) menggunakan serum anti Potyvirus, Tobamovirus (TMV), Cucumovirus (CMV), dan Fabavirus (BBMV) Siapkan antiserum 1/200 dalam coating buffer. Pipet 100 l ke dalam lubang mikroplate. Inkubasi 2 jam 37oC. Cuci lubang mikroplate dengan PBST 4 –5 kali. Lumatkan 0.1 g benih sakit dalam 1 ml extraction buffer. Pipet 100 l ke dalam lubang mikroplate. Inkubasi 2 jam 37oC. Cuci lubang mikroplate dengan PBST 4 –5 kali. Siapkan konjugat 1/200 dalam ECI buffer. Pipet 100 l ke dalam lubang mikroplate. Inkubasi 2 jam; 37oC. Cuci lubang mikroplate dengan PBST 4 –5 kali. Larutkan PNP 1 mg/ml dalam PNP buffer. Pipet 100 l ke dalam lubang mikroplate. Lihat perubahan warna sekitar 30 menit. Ukur nilai absorban 405 nm.