PEMERIKSAAN BAKTERI DENGAN PEWARNAAN ADI HARTONO 10/6/2008

Pewarnaan Suatu teknik untuk mempelajari morfologi bakteri dengan cara pemberian zat warna kepada sel bakteri. Bagian-bagian sel dapat diamati, karena dapat menyerap zat warna yang berbeda oleh masing-masing bagian sel. 10/6/2008

Kenapa perlu diwarna ? Bakteri ukurannya sangat kecil 05-1 u x 10 u Dibawah mikroskop tidak jelass bagian-bagian nya. Untuk melihat dengan jelas perlu diberi zat warna. 10/6/2008

Umumnya ada 2 macam zat warna Zat warna bersifat asam Komponen warnanya adalah anion Dalam bentuk garam natrium Zat warna bersifat basa Komponen warna kation. Dalam bentuk klorida 10/6/2008

Macam-Macam Zat Warna Bakteri No Nama Zat Pewarnaan Warna Bakteri 1 Sapranin Merah 2 Gentian violet Ungu 3 Methylen blue Biru 4 Malachit green Hijau 5 Karbol fuchsin 10/6/2008

Struktur Sel Sel terdiri dari : Dinding sel , terdiri dari : - lapisan peptidoglikan - asam teikoat Membran plasma, terdiri dari : - membran protein - lapisan fosfolipid 10/6/2008

Macam-Macam Pewarnaan Pewarnaan Sederhana - Menggunakan 1 macam zat warna. - Warna bakteri hanya 1 - Tidak dapat membedakan sifatnya. - Untuk melihat ukuran dan bentuknya. 10/6/2008

- Membedakan sifat bakteri. - Melihat bagian-bagian bakteri. 2. Pewarnaan Differensial - Menggunakan lebih dari 1 zat warna - Membedakan sifat bakteri. - Melihat bagian-bagian bakteri. - Dapat digunakan untuk identifikasi bakteri tahap awal. 10/6/2008

Macam-Macam Pewarnaan Differensial Pewarnaan Gram Pewarnaan BTA Pewarnaan Spora Pewarnaan Granul 10/6/2008

Fiksasi Proses melengketkan sediaan pada kaca obyek. Bakteri mati, tetpai tidak lisis. Secara Kimia : metanol Secara Fisika : pemanasan diatas nyala api. 10/6/2008

Pewarnaan Gram Ditemukan Christian Gram (1884). Pewarnaan dasar dan rutin dalam identifikasi bakteri lebih lanjut. Kuman dibagi dua : - Gram positif berwarna ungu - Gram negatif berwarna merah. 10/6/2008

Tahap pewarnaan Gram Perlakuan Waktu Gram + Gram - Pembuatan preparat Warna Bakteri Gram + Gram - Pembuatan preparat Fiksasi Gentian violet 30 detik ungu Cuci dengan air Larutan iodium - Cuci dengan air dan keringkan Dekolorisasi dengan alkohol 20 detik Sapranin merah 10/6/2008

Pewarnaan BTA Untuk mengidentifikasi kuman M. tbc dan M. leprae Kuman M.tbc dan M. leprae mempunyai dinding sel yang banyak mengandung lipid. Sukar ditembusi zat warna biasa. Perlu pemanasan. Bakteri M tbc dan M leprae berwarna merah. 10/6/2008

Tahap Pewarnaan BTA Buat preparat. Fiksasi Zat Warna Karbol Fuchsin sambil dipanaskan (tidak mendidih) 3 menit. Cuci dengan air Pelunturan dengan asam alkohol hingga bersih. Methylen blue 1 menit. 10/6/2008

Zat Warna Pewarnaan BTA Karbol fuchsin = merah. Methylen blue = biru. Asam alkohol sebagai peluntur. Kuman BTA positif : batang berwarna merah. Kuman BTA negatif : batang berwarna biru. Sensitifitas : 5000 BTA / ml sputum. 10/6/2008

Metoda Pewarnaan BTA Ziehl Nellson Kinyoun Gabbet Tan Tiam Hook. 10/6/2008

Sekian dan Terima Kasih 10/6/2008