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实验一 果蝇( Drosophila melanogaster ) 遗传学系列实验(一) ( 教材 p70-75) 果蝇的观察、性别鉴定、接种与培养.

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2 实验一 果蝇( Drosophila melanogaster ) 遗传学系列实验(一) ( 教材 p70-75) 果蝇的观察、性别鉴定、接种与培养

3 主要实验内容: 1 培养瓶棉塞的制作、灭菌,培养基配制 2 观察辨认: 生活史的观察; 各类突变类型的观察; 雌雄性别的鉴别( 熟练,准确 ) 3 总结: 果蝇遗传学理论和应用研究中的重要意义。 目的: 掌握遗传学模式物种(果蝇)的特征、培养方法

4 下面先准备果蝇杂交用的试管及棉塞: 大试管 大试管 3 支 / 小组(亲本杂交用) 免疫小指管 20 只 / 小组(挑处女雌用) 小试管 6 个 / 组(收集亲本雄蝇) 滴管 1 支 / 小组 灭菌 (各小组可用报纸包在一起) 将棉花以纱布 包裹制做棉塞 滤纸条 (吸水) 灭完菌取出 (背景知识讲完、灭菌基本结束时,用这些物品制作培养管。)

5 背景知识: 1. 果蝇( Drosophila melanogaster ) : 昆虫纲 , 双翅目,有翅亚目, 果蝇科 / 属 常用的黑腹果蝇在自然界广泛存在。 Drosophila :” 喜欢露水 ” ; melanogaster : ” 黑色消化道 ” ——“ 黑肠喜露果蝇 ” (黑腹果蝇) 果蝇科有 60 多属,果蝇属最常见

6 2. 果蝇作为遗传学研究材料的优点 体型小 繁殖力强 世代周期短 易饲养 突变体多,遗传背景清楚 染色体少,有巨大染色体

7 3. 果蝇生活史 完全变态 最适温度: ℃ 25 ℃ 十天左右一个周期 成虫寿命 ~4 周 羽化后 12h 可交配 →2d 后产卵

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9 5. 培养条件 4. 结构特征 分 头、胸、腹 雌雄区别明显: 个体大小 腹部形态 腹部背面条纹 腹部腹片 交配器官 性梳的有无 食性:酵母菌等 培养基:玉米酵母培养基

10 白眼( white ) w 1 复眼白色(野生型复眼呈红色) 黑檀体( ebony ) e 3 身体呈乌木色,黑亮 黑体( black ) b 2 体黑色,比黑檀体深 黄体( yellow ) y 1 全身呈浅橙黄色 残翅( vestigial ) vg 2 翅明显退化,只残留一部 分痕迹,不能飞 小翅( miniature ) m 1 翅比野生型者短,与腹部 末端几乎等长 卷刚毛( singed ) sn 3 1 刚毛呈卷曲状 棒眼( Bar ) B 1 复眼呈狭窄垂直棒形,小 眼数少 褐眼( brown ) bw 2 眼呈褐色 卷曲翅( Curly ) Cy 2 翅膀向上卷曲,纯合致死 叉毛( forked ) f 1 体毛和刚毛分叉且卷曲 猩红眼( scarlet ) st 3 复眼呈明亮猩红色 突变性状 基因符号 染色体定位 性状特征

11 残翅 棒眼 白眼 黑檀体 野生型 小翅

12 直刚毛 卷刚毛

13 方法步骤 1. 果蝇生活史的观察: p73-74 卵、幼虫、蛹、成虫 2. 果蝇成虫外形的观察和性别鉴定 : p71 取蝇:培养瓶 - 麻醉瓶口对口 麻醉: 2-3 滴乙醚, 2-3min (死亡标志?) 观察:塑料垫板,毛笔,放大镜 放回培养:平躺苏醒 → 扶正培养 * 列表:雌雄区别 3. 果蝇几种突变类型的观察 * 列表:下页

14 类型 特征 野生型 ( + ) 黑檀体 ( e ) 残翅 (vg) 白眼 ( w ) 小翅 (m) 卷刚毛 ( sn³ ) 黄体 ( y ) 棒眼 ( B ) 体色 眼色 翅形 眼形 刚毛 形态 填表:

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19 本实验室的三隐性:白眼,小翅,卷刚毛 符号 X mwsn3

20 果蝇培养基配方 玉米粉 80g 蔗糖 70g 加水至 1000ml 混匀、 加热 琼脂粉 7g 不断搅拌至煮沸 2-3 分钟 15% 苯甲酸 2ml 正丙酸 2ml 稍凉( ℃)后加干酵母粉 20g 每小组配置 200ml 防腐,配少量时可估计 混匀,倒进培养瓶 ( 管 ) ,冷凝(大试管摆放斜面)

21 常见错误 / 问题 镊子 / 手取果蝇 白板、手掌大批倾倒 果蝇入瓶 条纹不清 过烫时加酸、酵母 导致死亡、污染 污染、黏着 难辨雌雄(因刚孵出。可 借助性梳) 酸挥发、酵母烫死(应在 ℃) 错误 / 问题 后果(说明)

22 1. 通过本试验可达到哪些目的? 2. 通过你对果蝇雌雄个体的鉴别,你认为哪几个特征 在鉴别中是主要的? 思考题


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