Penyiapan Sampel
PS 2010
PS 2010
PS 2010
PS 2010
PS 2010
PS 2010
Supercritical fluid extraction elekroforesis Supercritical fluid extraction PS 2010
Bagaimana seharusnya sampel disiapkan ? ? ? PS 2010
Rumus [ molekul, bangun ] C7H6O3 C7H6O3 C7H6O3 Apakah Informasi Yang Diperoleh ??? VMA 2010 PDHLN
Asam Salisilat
As. Salisilat - Fluorescensi
Pustaka Moffat, A.C., 1986, Clarke’s Isolation and iden tification of drugs in pharmaceuticals, body fluids, and post-mortem material, Second edition, Pharmaceutical Press, London. Informasi: - Kelarutan - Tes warna - pKa - logP - Gas Chromatogr. - UV Spectr. - Infra Red Spectr. - TLC - HPLC PS 2010
Perhatikan bentuk sampel Serbuk Tablet Sirop Cairan Lain … ? PS 2010
Pemisahan Pemisahan senyawa dari cupilkan/sampel: padat, cair, cairan biologis (urin, darah, faeces), jaringan tanaman, dll, dilakukan dengan: - distilasi, soxhletasi, - ekstraksi cair-cair - deproteinisasi sampel - ekstraksi dengan kolom PS 2010
Penimbangan
Cara Penimbangan Timbang lebih kurang Timbang saksama Prosedur : - Timbang saksama lebih kurang 100 mg sampel yang telah dihomogenkan… PS 2010
Penimbangan Apa yg pertama harus dilakukan ? Bagaimana memilih neraca yang tepat dan benar ? Wadah jenis apa yang digunakan ? PS 2010
TEKNIK MENIMBANG Weighing by difference: Wadah + zat = A g Wadah + sisa = B g Berat zat = A - B g Weighing by addition: Wadah ditimbang = C g Wadah + zat = D g Berat zat = D - C g PS 2010
- Analytical 0,1 4 - Semimicro 0,01 5 - Micro 0,001 6 SR-03 : Persyaratan Tambahan Untuk Akreditasi Laboratorium Pengujian Kimia dan Biologi Balance Kepekaan (mg) Digit [dbk, g] - Analytical 0,1 4 - Semimicro 0,01 5 - Micro 0,001 6 - Ultramicro 0,0001 7 Berapa mg terkecil bahan boleh ditimbang dengan neraca tersebut di atas ? PS 2010
SR-03 Neraca: Untuk semua tipe neraca tsb di atas pada saat digunakan, parameter yang harus dicek: level of balance zero point cleanliness Tiap bulan(an): cek akurasi, dengan standard reference weights one point check calibration procedure should be documented PS 2010
SR-03 Neraca: Tiap setengah tahunan: parameter diperiksa: menggunakan: repeatability linearity Reference weights accuracy PS 2010
SR-03 Persyaratan/catatan: Calibration over full range Repeatability of readings: 10 kali penimbangan dilakukan dengan anak timbangan mendekati berat maksimal kapasitas neraca. Reference weights to be calibrated every three years. PS 2010
Bagaimana dengan microbalance ? Kalibrasi dilakukan tiap 4 bulanan menggunakan = reference weights Parameter yang dicek: Repeatability Linearity Accuracy PS 2010
Neraca Bagaiamana sebaiknya kalibrasi neraca tersebut dilakukan ? Siapa yg harus mengkalibrasi ? PS 2010
Deproteinisasi PS 2010
Deproteinisasi Mengapa Sampel Perlu di deproteinisasi ? ? ? PS 2010
Metode yang paling umum digunakan : - Pengendapan protein Deproteinisasi Metode yang paling umum digunakan : - Pengendapan protein sebagai garam yang tidak larut PS 2010
Pengaruh pH Protein muatan positif muatan negatif pH rendah ( asam kuat ) pH tinggi ( basa kuat ) muatan positif muatan negatif PS 2010
bereaksi dng anion ttt. membentuk garam tak larut Pengaturan pH Sampel (protein) pH larutan < pH larutan > titik isoelektrik protein sbg kation protein sbg anion bereaksi dng anion ttt. membentuk garam tak larut bereaksi dng kation ttt. membentuk garam tak larut PS 2010
Precipitating Agents Anionik Kationik pikrat Ion-ion logam berat spt. : molibdat tungstat sulfosalisilat metafosfat perklorat trikloroasetat - seng merkuri Kadmium uranium besi tembaga timbal (Zn) (Hg) (Cd) (U) (Fe) (Cu) (Pb) ZnSO4 ZnSO4/Ba(OH)2 PS 2010
Protein Structure McMurry, J Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition p. 1010. Protein PS 2010
Protein Structure McMurry, J Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition, p. 1011 Secondary Tertiary PS 2010
Protein Structure McMurry, J Protein Structure McMurry, J., 2004, Organic Chemistry, Sixth Edition p. 1016 Protein denaturation heat PS 2010
Deproteinisasi dgn dehidrasi Bila sejumlah tertentu air dihilangkan dari protein Protein akan mengendap SENTRIFUGASI PS 2010
Deproteinisasi dgn cara dehidrasi “ Solvent “ ( suhu rendah ) Asetonitril Aseton Metanol Etanol “ Salting out ” ( protein pada titik isoelektrik ) + Garam ( Na sulfat, Na sulfit ) Protein mengendap PS 2010
PS 2010
PS 2010
Penyiapan Sampel mineral PS 2010
Penyiapan Sampel Mineral ( unsur logam ) analisis secara : Atomic Absorption Spectrophotometry Sampel harus diperlakukan khusus DIGESTI / DESTRUKSI PS 2010
Destruksi Bahan Organik Wet digestion menggunakan : - Asam pengoksidasi - Campuran asam Sampel : - jaringan hewan / tanaman - bahan organik Misal : HNO3 + HClO4 + H2SO4 (3 : 1 : 1) HNO3 + H2SO4 (20 – 30 mL : 5 mL) HNO3 + HClO4 PS 2010
Destruksi Bahan Organik … Waktu : 0,5 – 1 jam Lakukan : Dalam almari asam Hasil : Bahan organik teroksidasi CO2 + H2O + bahan volatil meninggalkan : - sisa garam - asam anorganik PS 2010
Dry Ashing Wadah : Krus porselin Tempat : Tungku / Furnace (suhu : 400 – 700 °C) Oksidan : O2 (udara) Hasil : - Bahan organik terbakar - Residu senyawa anorganik PS 2010
Dry ashing … Bahan pengoksidasi tambahan : Mg(NO3)2 Residu : - Pindahkan dari krus dengan bantu- an HCl 6 M Waktu : 2 – 4 jam PS 2010
Sampel Sampel padat Sampel cair Sampel sediaan obat - tablet - sirop - kapsul - cairan - kaplet - injeksi PS 2010
Sampel … Penyiapannya ikuti : Farmakope Indonesia atau Compendia Resmi ( USP, BP, Eur.P, Jpn.P ) PS 2010
PS 2010
Liquid-Liquid Extraction (LLE) Sample Schematic of LLE process
PS 2010