Hibah Kompetensi ISOLASI DAN EKSPRESI GEN DALAM RANGKA PERAKITAN TANAMAN YANG TOLERAN TERHADAP CEKAMAN ASAM DAN ALUMINIUM Peneliti: Suharsono Muhammad Jusuf Utut Widyastuti Pusat Penelitian Sumberdaya Hayati dan Bioteknologi Lembaga Penelitian dan Pemberdayaan Masyarakat Institut Pertanian Bogor
STRATEGI PENELITIAN Isolasi cDNA MmAct Tahun I-II Isolasi cDNA MmMt2, GmMt2 Tahun I Pembakuan metode transformasi genetik M. affine Tahun I-II MmMt2,GmMt2 Fragmen MmPma Isolasi cDNA MmPma Tahun II-III MmPma MmAct Aksesi J. curcas Almt1-1 Pembakuan metode transformasi genetik J. curcas Tahun II Isolasi cDNA MmSod Tahun II-III MmSod Konstruksi vektor ekspresi Tahun I-II Analisis toleransi: pH rendah; Al Tahun II Analisis ekspresi gen Tahun III Metode baku transformasi genetik Gen resistensi Al J. curcas transgenik
HASIL HIBAH KOMPETENSI Telah diisolasi dan diklon cDNA dari gen: MmMt2 dari M. malabathricum GmMt2 dari kedelai MmCu/Zn -Sod dari M. malabathricum: didaftarkan di GenBank/EMBL/DDBJ = AB500685 Mmpma penyandi Plasma membran ATPase dari M. Malabathricum utuh (3157 pb) 4 klon actin dari M. malabathricum: didaftarkan di GenBank/EMBL/DDBJ = AB500686, AB500687, AB500688, AB500689 (595 ~ 716 pb) 5’UTR & 3’UTR dari MmCu/Zn-Sod 3’UTR dari Mmpma
HASIL HIKOM (lanjutan) Telah mendapatkan A. tumefaciens yang membawa vektor ekspresi untuk gen: MmMt2 sense MmMt2 antisense MmCu/Zn -Sod sense MmCu/Zn -Sod antisense inverse repeated 3’UTR dari MmCu/Zn -Sod (RNAi) inverse repeated 3’UTR dari Mmpma (RNAi)
HASIL HIKOM (lanjutan) Telah mendapatkan tanaman transgenik: metode transformasi genetik M. malabathricum melalui A. tumefaciens M. malabathricum yang mengandung: Mmpma RNAi, MmCu/Zn-Sod RNAi, MmCu/Zn-Sod antisense N. tabacum yang mengandung MmCu/Zn-Sod sense Telah mendapatkan tunas transgenik: J. curcas yang mengandung MmCu/Zn-Sod sense