Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt. Analisis Vitamin dan Hormon.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt. Analisis Vitamin dan Hormon."— Transcript presentasi:

1 Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt. Analisis Vitamin dan Hormon

2 VIT-HOR Vitamin Vitamin CNikotinamidVitamin B1.HCl 2 Vitamin B12

3 VIT-HOR Vitamin 3

4 4VIT-HOR Multivitamin Vit.CVit.B2Vit.B1 Vit.B6 Niacin Niacinamid Folic Acid

5 5VIT-HOR Pemisahan Vitamin-Vitamin Yang Larut Air [ ion-pairing reagents ]

6 6VIT-HOR Kolom

7 7VIT-HOR Gambar: 1

8 8VIT-HOR Alkylamines Ion Pair Reagent Alkylsulfonates

9 VIT-HOR Vitamin B-12 9

10 VIT-HOR Vitamin B- 12 Untuk Zat Tunggal, dapat dianalisis secara: Spektrofotometri UV atau Vis 10

11 VIT-HOR HPLC Multivitamin 11

12 VIT-HOR Kromatogram HPLC 12

13 VIT-HOR Hasil Pemisahan HPLC 13

14 VIT-HOR Vitamin C = Ascorbic Acid 14

15 VIT-HOR Metode Penetapan Kadar Zat Tunggal  Titrasi Secara Iodimetri (Redok)  Titrasi dengan Diklorofenolindofenol (DCIP) 15

16 VIT-HOR Netralisasi  Timbang seksama lebih kurang 400 mg, larutkan dalam campuran 100 mL air dan 25 mL asam sulfat 2N, tambahkan 3 mL kanji LP. Titrasi segera dengan iodium 0,1N LV.  Kesetaraan: - Satu (1) mL iodium 0,1N setara dengan 8,806 mg C 6 H 8 O 6 [ Vitamin C ] Pen. Kadar Vitamin C [ Iodimetri ] 16

17 VIT-HOR Pen. Kadar Vitamin C [ Iodimetri ] Satu (1) mL iodium 0,1N setara dengan 8,806 mg C 6 H 8 O 6 [ Vitamin C ] BM = 176,13 17

18 VIT-HOR Vitamin C Ascorbic Acid Dehydroascorbic Acid HSCH 2 CH(SH)CH 2 OH : 2, 3-dithiol-Propanol Reducing agent and converts dehydroascorbic acid to ascorbic acid Metode Diklorofenolindofenol [ DCIP ] 18

19 VIT-HOR Titration Method for Reduced Vitamin C 1. Extract with metaphosphoric acid (HPO 3 ) in HOAC. 2. Titrate with 2, 6-dichloroindophenol (blue). At end point, rose pink (2, 6-dichloroindophenol in acidic condition). 19

20 VIT-HOR Oxidation and Reduction of Ascorbic Acid O O OH HO HOH 2 C H + N Cl O OH H HOH 2 C O O O O + OH NH Cl Cl HO Pink color in acidic condition Extra oxidized indophenol form in the absence of ascorbic acidic gives pink color at end point 2,6-dichloroindophenol Blue Color 20

21 VIT-HOR Calculation for Reduced Vitamin C A = ml of 2,6-dichloroindophenol for sample titration B = ml of 2,6-dichloroindophenol for blank F = mg of ascorbic acid equivalent to 1 ml of indophenol standard solution V =Initial assay solution volume E = Number of grams X = Volume sample aliquot titrated 21

22 VIT-HOR Vitamin B1 HCl 22

23 Vitamin B 1.HCl Metode Penetapan Kadarnya: Titrasi dengan NaOH Titrasi Bebas Air (dengan HClO 4 ) Titrasi Argentometri TBA

24 VIT-HOR Vitamin B- 1 HCl  Titrasi Bebas Air (TBA) dengan HClO 4, dalam asam asetat glasial, indikator p-Naftol benzein atau Quinaldin merah. -Adanya Cl, dihilangkan/diendapkan dg pe + an (CH 3 COO) 2 Hg. Mengapa ? Kesetaraan: 1 mL 0,1 N HClO 4  0,1 x BM/2 mg Vit B1 24

25 VIT-HOR Vitamin B1 HCl  Klorin total dalam Vitamin B1 dapat ditentukan dengan: -melarutkan dalam air + asam nitrat encer + larutan AgNO 3 >>>, ttt. Endapan yang terbentuk disaring, dicuci dengan air. Cairan hasil cucian (sisa AgNO 3 ) dititrasi dengan NH 4 CNS. Kesetaraan: 1 mL 0,1 N AgNO 3  35,46 mg klorin 25

26 VIT-HOR Vitamin B 1 HCl  Klorin sebagai hidroklorid ditentukan dengan cara titrasi menggunakan 0,1 N NaOH, indikator biru brom timol. Kesetaraan: 1 mL 0,1 N NaOH  35,46 mg klorin 26

27 VIT-HOR Thiamin HCl 27

28 Tiokrom Fluorescensi Biru

29 PK. Obat Secara Spektrofluorometri

30 PK. Riboflavin

31 Riboflavin nm ,

32 32VIT-HOR

33 33VIT-HOR

34 Riboflavin PK. Spektrofluorometri dalam asam asetat 5 %, eksitasi = 445 nm emisi = 530 nm (Fluorescensi : hijau kekuningan)

35 Riboflavin Riboflavin (µg/mL)Intensitas fluorescensi 0,105,8 0,2012,2 0,4022,3 0,8043,3.... ?15,4 Y = 52,9739 X + 1,0348 ; r = 0,999;  = 88,9 0 Kadar = 0,27 (µg/mL)

36 Riboflavin (µg/mL)Intensitas fluorescensi 0,100,058 0,200,122 0,400,223 0,800, ?0,154 Y = 0,5297 X + 0,0104 ; r = 0,999;  = 27,9 0 Kadar = 0,27 (µg/mL) Bila intensitas fluorescensi dibagi : 100 Riboflavin

37 Tabel : Koef. Korelasi [r] db 0,100,050,020,010,001 10,9880,9970,9991,000 20,9000,9500,9800,9900,999 30,8050,8780,9340,9590,992 40,7290,8110,8820,9170,974 50,6690,7540,8330,8740, ,3600,4230,4920,5370,652 p

38 Y = b X + a Y= nilai respon X= kadar senyawa baku r= koefisien korelasi db= derajad bebas p= taraf kepercayaan / limit of confidence

39 db = n - 2 Literatur : Skoog, D.A., 1985, Principles of Instrumen- tal Analysis, Third Edition, Sounders College Publishing, New York. Harris, D.C., 1987, Quantitative Chemical Analysis, Second Edition, W.H. Freemand and Company, New York. Miller, J.C. and Miller, J.N., 1988, Statistical for Analytical Chemistry, Second Edition, John Wiley & Sons, New York.

40 VIT-HOR Labu Takar TC 20 O C 40

41 Perlukah Metode Titrasi DiValidasi ???

42 VIT-HOR  Volumetric solution do not differ from the prescribed strength by more than 10 per cent. The molarity of the volumetric solution is determined by an appropriate number of titrations. The repeatability does not exceed 0.2 per cent (relative standard deviation).  Misal, akan dibuat larutan baku 0,1 N, European Pharmacopoeia ( p.514 ), ,09 - 0,11 [ RSD ≤ 0,2 % ] Yang diperbolehkan : 42

43 VIT-HOR Validasi Metode Titrasi

44 VIT-HOR Ermer and Miller, 2005, p

45 Is the volumetric method to be validated ? 30

46 VIT-HOR46

47 VIT-HOR Hormon 47

48 VIT-HOR Kortison dan Hidrokrtison Kortison Kelarutan dalam pelarut: Air : 1 : Etanol : 1 : Kloroform : 1 : 4 Sedikit larut dalam eter Hidrokortison Kelarutan dalam pelarut: Air : 1 : Etanol : 1 : 230 Kloroform : sedikit larut Larut dalam dioksan 48

49 VIT-HOR Hormon Hidrocortison dll… 49

50 VIT-HOR Kortison 50

51 VIT-HOR Hidrokortison 51

52 VIT-HOR Reprodusibilitas Antar Column Batch 52

53 VIT-HOR Hormon 53

54 VIT-HOR Steroid 54

55 VIT-HOR Norgestrel 55

56 VIT-HOR Norgestrel 56

57 VIT-HOR Hormon Norgestrel 57

58 VIT-HOR Norgestrel 58

59 VIT-HOR Terima Kasih 59

60 VIT-HOR60


Download ppt "Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt. Analisis Vitamin dan Hormon."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google