Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

Presentasi sedang didownload. Silahkan tunggu

26/05/2010Seminar Tugas Akhir 1 Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo Anita Herawati Permana 105 06 033 Dr. Fida Madayanti Waganegara.

Presentasi serupa


Presentasi berjudul: "26/05/2010Seminar Tugas Akhir 1 Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo Anita Herawati Permana 105 06 033 Dr. Fida Madayanti Waganegara."— Transcript presentasi:

1 26/05/2010Seminar Tugas Akhir 1 Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo Anita Herawati Permana Dr. Fida Madayanti Waganegara

2 Seminar Tugas Akhir 2 26/05/2010 Agenda Presentasi PENDAHULUAN STRATEGI PENELITIAN HASIL KESIMPULAN

3 PENDAHULUAN Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Seminar Tugas Akhir 3 26/05/2010

4 Seminar Tugas Akhir 4 26/05/2010 Latar Belakang (1 dari 3) Aplikatif di Industri

5 Seminar Tugas Akhir 5 26/05/2010 Latar Belakang (2 dari 3) ENZIM (BIO KATALIS) RAMAH LING- KUNGAN REAKSI LEBIH EFISIEN REAKSI LEBIH TERARAH PERMASALAHAN: Proses industri umumnya memerlukan suhu tinggi!!! ENZIM TERMOSTABIL

6 Seminar Tugas Akhir 6 26/05/2010 Latar Belakang (3 dari 3) ENZIM TERMOSTABIL MIKROORGANISME TERMOFILIK MIKROORGANISME TERMOFILIK Mampu mempertahankan struktur 3D di suhu tinggi RING OF FIRE!!! YTae-13 (Aminin, 2008) YTae-13 (Aminin, 2008)

7 Seminar Tugas Akhir 7 26/05/2010 Ruang Lingkup (1 dari 2) YTae-13 (Rizqi, 2009) YTae-1 YTae-13

8 Seminar Tugas Akhir 8 26/05/2010 Ruang Lingkup (2 dari 2) (Rizqi, 2009)

9 Seminar Tugas Akhir 9 26/05/2010 Tujuan mengisolasi enzim lipase yang diekspresikan oleh YTae-13, dan mengarakterisasinya

10 STRATEGI PENELITIAN Seminar Tugas Akhir 10 26/05/2010

11 Seminar Tugas Akhir 11 26/05/2010 Strategi Penelitian (1 dari 3) Isolat YTae-13 # Pembuatan Kurva Pertumbuhan # Pembuatan Kurva Produksi Enzim Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi Enzim # Penumbuhan Starter # Produksi Enzim # Isolasi Enzim (Panen) Ekstrak Kasar Enzim (EKE)

12 Seminar Tugas Akhir 12 26/05/2010 Strategi Penelitian (2 dari 3) Ekstrak Kasar Enzim (EKE) # Fraksinasi Ammonium Sulfat # Dialisis EKE, Enzim Fraksi 0-20% jenuh, Enzim Fraksi 20-40% jenuh, Enzim Fraksi 40-60% jenuh, Enzim Fraksi 60-80% jenuh, Enzim Fraksi % jenuh # Uji Aktivitas Spesifik Fraksi Aktif

13 Seminar Tugas Akhir 13 26/05/2010 Strategi Penelitian (3 dari 3) Fraksi Aktif # Elektroforesis Native-PAGE # Perlakuan kejut panas Karakter Enzim # Zimografi # Karakterisasi Fraksi Lebih Murni

14 Seminar Tugas Akhir 14 26/05/2010 Mikroorganisme Thermophilic (40 – 100 o C) Pshycophilic (1-5 o C) Hyperthermophilic (>> 120 o C) Mesophilic (20-37 o C) Kondisi Sumber Air Panas Gedong Songo Temperatur82 o C pH6 Kondisi airjernih

15 Seminar Tugas Akhir 15 26/05/2010 YTae-13 NamaKomposisi GSA GSB YT MB TS G 0,15 % yeast dan 0,15 % tripton 0,5 % pepton; 0,25 % yeast; 0,5 % NaCl 0,02 % yeast dan 0,02 % tripton 0,02 % beef extract; 0,02 % pepton; dan 0,01 % NaCl 5 gram/100mL kaldu tauge dan 0,02 % sukrosa 0,1 % glukosa NoStrainKedekatan Relatif dYTae-1 dYTae-3 dYTae-5 dYTae-13 dYTae-14 dGae-3 dNBae-1 dNBae-1X dNBae-3X Geobacillus sp.E263 Geobacillus thermoleovorans Geobacillus lituanicus BGSCW9A9 Geobacillus vulgivagus CDZ1 Geobacillus thermoleovorans Tl Thermus sp.RH-0401 Geobacillus sp.E263

16 Fraksinasi dan Dialisis Seminar Tugas Akhir 16 26/05/2010

17 Seminar Tugas Akhir 17 26/05/2010 Aktivitas Spesifik Aktivitas enzim per kadar protein Enzim + Bradford (1 : 3) Penentuan Kadar Protein Penentuan Aktivitas 595 nm + LIPASE, 15’, 65 o C, pH nm

18 Native-PAGE dan Zimografi Seminar Tugas Akhir 18 26/05/2010 Elektroforesis Gel Poliakrilamid Ukuran besar, muatan positif tinggi Ukuran besar, muatan positif rendah Ukuran kecil, muatan positif tinggi Ukuran kecil, muatan positif rendah

19 HASIL Seminar Tugas Akhir 19 26/05/2010

20 Seminar Tugas Akhir 20 26/05/2010 YTae o C70 o C

21 Seminar Tugas Akhir 21 26/05/2010 Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi Enzim (Suhu 70 o C)

22 Seminar Tugas Akhir 22 26/05/2010 Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi (Suhu 55 o C)

23 Seminar Tugas Akhir 23 26/05/2010 Inokulasi ke media produksi, Inokulum 10% V/V, Inkubasi 17 jam Sentrifugasi Isolasi Enzim YTae-13 Inkubasi 55 o C, pH 6,5, 150 rpm (starter) OD 0,5-0,8 (sekitar 13 jam) Supernatan: Ekstrak Kasar Enzim (EKE)

24 Seminar Tugas Akhir 24 26/05/2010 Aktivitas Spesifik Lipase Hasil Fraksinasi 0,753 0,206 0,277

25 Seminar Tugas Akhir 25 26/05/2010 Native-PAGE M

26 Aktivitas Spesifik setelah Perlakuan Kejut-Panas Seminar Tugas Akhir 26 26/05/2010

27 KESIMPULAN YTae-13 dapat mengekspersikan lipase lebih dari satu kali selama fasa hidupnya. Setelah dilakukan fraksinasi dan dialisis terhadap enzim lipase puncak ketiga, aktivitas spesifik tertinggi ditunjukkan oleh fraksi ammonium sulfat 0-20% jenuh. Perlakuan kejut-panas membuat kemurnian enzim meningkat dengan tersingkirkannya enzim-enzim non-termostabil. Seminar Tugas Akhir 27 26/05/2010

28 Seminar Tugas Akhir 28 26/05/2010 REFERENSI Lee, Dong-Woo, et. al Isolation and Characterization of a Thermophilic Lipase from Bacillus thermoleovorans ID- 1. FEMS Microbiology Letters 179,

29 Seminar Tugas Akhir 29 26/05/2010 TERIMA KASIH


Download ppt "26/05/2010Seminar Tugas Akhir 1 Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo Anita Herawati Permana 105 06 033 Dr. Fida Madayanti Waganegara."

Presentasi serupa


Iklan oleh Google